消屑灵软膏对实验性银屑病病理模型影响地研究.pdfVIP

消屑灵软膏对实验性银屑病病理模型影响的研究 王学军 王伟明 李继吕 扬建宏 张俊威 黑龙江省中医研究院中药研究所 (150036) 黑龙江省中医研究院皮肤科总结多年临床经验，研制出祛屑灵软膏，应用于I临床治疗银屑病患者， 收到了满意疗效。为了进一步证明其疗效及作用机制，作者利用银屑病病理模型对该药进行了药效学 研究，从而对其有效性做科学客观的评价。 1，材料和方法 1．1药物与试剂 消屑灵软膏由雄黄、黄柏、大黄、樟脑等6味药组成，每g软膏所含生药量为 处，每日2次；喜树碱由湖北黄石制药厂生产，批号020801；秋水仙碱片由昆明制药集团股份有限公 司提供，批号2002】】?1；己烯雌酚由上海通用药业股份有限公司生产，批号020505；盐酸普萘洛尔 1 由东北制药总厂生产，批号0304 (P1PK30)均购于哈尔滨中加化工试剂公司。 1．2动物 昆明种小鼠和豚鼠均由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供。 }．3方法 1．31消屑灵对小鼠尾部鳞片表皮的影响取体重为18-229小鼠40只，雌雄备半。随机分为空白 对照组．喜树碱阳性药对照组、消屑灵高、低剂量组。阳性对照组和消屑灵低剂量组每日1次涂抹尾 部，消屑灵高剂量组每Et2次涂抹，连续用药14d后处死小鼠，取距尾根约1．$crn处的背酃表皮，进 行常规组织切片，HE染色。在光学显微镜下观察鼠尾皮肤角化层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层、 真皮层和毛囊等变化，并计数100个鳞片中有颗粒层形成的鳞片散(凡两个毛囊口之间的鳞片表皮有 排列成行的颗粒层者计为有颗粒层形成的鳞片)。 1．3．2消屑灵对雌性周期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响取体重18—229雌性小鼠50只， 随机分成2组，空白组1 0只，模型组40只。模型组连续3d腹腔注射已烯雌酚，每日1次，每次0． 2mg／只，诱导小鼠处于雌激素周期。第4d早上将小鼠随机分成4组，喜树碱阳性药对照组、基质 组、消屑灵高、低剂量组。于早8：00开始给药，以左手背位圈定小鼠，右手取预先吸有药物0．05ml／ 只的钝性管，小心插人阴道2-3mm，分别灌注药物。消屑灵高剂量组每日给药2次，低剂量组和喜树 碱组每日给药1次，基质组绘基质不给药。基于动物细胞有丝分裂的昼夜节律性，每组实验时间均加 中期，便于计数。6h后杀死动物，切取阴道组织，作常规组织切片，HE染色，在光学显徽镜下观察 并计数基底细胞中所出现的有丝分裂数，即以基底层(单层)圆柱状细胞为分母，与该区段的分裂相 细胞为分子，分别计数每个样品5个趴上不阔部位，抉算成每100个基底细胞的有丝分裂数，结果以 有丝分裂指数(％)表示。 1．3．3消屑灵对盐酸普萘洛尔所致豚鼠耳部皮肤银屑样皮损模型的影响取盐酸普萘洛尔sg， 59为成膜 以50％乙醇为溶剂，使药物溶解，加人Azone一丙二醇5roL．作为复合促进剂，加人PVPK30 OO jo％乙醇至1rnL，制备盐酸普萘洛尔乳搽荆。 材料，tl,／Jll 药后杀死正常组和模型组各4只豚鼠分别取双侧耳廓皮肤标本，甲醛固定，HE染色，光镜观察，以此 评价造模质量。 将模型组剩余的24只豚鼠随机分成4组，即模型组、阳性药对照组、消屑灵高，低剂量组。模 型组不用任何药物，作为皮损模型自然恢复对照组；消屑灵高剂量组每日给药2次，其余组每日1次。 右侧耳背部皮肤涂抹基质，左侧抹药。用药2周后，取豚鼠两侧耳廓皮肤，用lo％福尔马林固定，石 蜡包埋，HE染色，观察耳部皮肤角化层，颗粒层、棘细胞层，基底细胞层及固有层的变化，并在光 学显微镜’F(x400)用测微尺测表皮厚度，然后换算成实际厚度(用mm表示)，进行各组间差异性 比较。 1．3．4统计学分析所有数据均以均数±标准差(i±s)表示，进行方差分析，采用SPSS软件处理。 2，结果 2．1消屑灵对小鼠尾部鳞片表皮的影响由表l可见，消屑灵对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成有明显的 促进作用，与空白对照组比较，差异极显著(P0．01)。病理组织学检查结果显示，正常组小鼠尾 表皮颗粒细胞较少，给药组表现为角质不均或消失，颗粒层增生。棘细胞层增厚和基底细胞分裂相减 少等表皮等变化。其