纳升级反相液相色谱_串联质谱法分析蜈蚣提取蛋白质.pdfVIP

42 (FENXI HUAXUE) 2 第 卷 分析化学 研究报告 第 期 2014 2 Chinese Journal of Analytical Chemistry 239 ～ 243 年 月 DOI :10． 3724 /SP． J． 1096． 2014． 30894 - 纳升级反相液相色谱 串联质谱法分析蜈蚣提取蛋白质 陈 霞1 文红梅* 1 刘 睿1 朱 栋1 李 伟1 周红光2 吴勉华2 ( 1 ; 2 ， 京210023) 南京中医药大学药学院 中医学一级学科 南 - (nanoＲPLC-MS /MS) 摘 要 结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和纳升级反相液相色谱 串联质谱 法系统分析了蜈蚣 ， 。 nanoLC : 提取蛋白质胶内酶解和直接酶解产物 并进行数据库检索鉴定蛋白质 建立的 分析条件为 上样 8 L ， Chrom XP-C (350 m × 0． 5 mm ，3 m)，2% (0． 1% )-98% (0． 1% ) μ 经 18 毛细管柱 μ μ 乙腈 甲酸 乙腈 甲酸 梯度 90 min ; ESI-Q-TOF MS ， IDA 。 72 洗脱 采用 并在 采集模式下分析鉴定蜈蚣提取蛋白质 胶内酶解鉴定到 种蛋 ， 97 ， 26 。 ， 白质 直接酶解鉴定到 种蛋白质 二者含 种相同的蛋白质 通过数据库比对 分析了蜈蚣提取蛋白质的 、 。 、 、 ， 生物进程 细胞组分以及功能活性 得到蜈蚣蛋白质具有结合 酶催化 肌动等功能活性 其中结合活性的蛋 ， 。 白质占的比例较大 且多为能量代谢进程中的相关酶类 - ; ; ; 关键词 纳升级反相液相色谱 串联质谱 蜈蚣 蛋白质 聚丙烯酰胺凝胶电泳 1 引 言 蜈蚣为节肢动物门唇足纲整形目蜈蚣科动物少棘巨蜈蚣(Scolopendrasubspinipes． mutilans L． Koch) ［1］ ， 、 、 ， 。 的干燥体 具有息风镇痉 通络止痛 攻毒散结等功效 已广泛用于临床疾病的治疗 蜈蚣主要含有 、 、 、 、 ［2 ～ 4］， ， 50% ～ 70% 。 蛋白质 脂肪酸 氨基酸 总脂 微量元素等 且蛋白质为其主要成分 占总成分的 药 ［5 ，6］、 ［7 ，8］、 ［9］、 ［10］ 。