蛇毒抗高凝状态酶、氟尿嘧啶对BEL-7404细胞作用的实验研究-_医学论文.docVIP

蛇毒抗高凝状态酶、氟尿嘧啶对BEL-7404细胞作用的实验研究-_医学论文 蛇毒抗高凝状态酶、氟尿嘧啶对BEL-7404细胞作用的实验研究*_医学论文 【摘要】 目的 通过蛇毒抗高凝状态酶(AHCSE)、氟尿嘧啶（5-FU）对人肝癌细胞BEL-7404（简称7404细胞）、正常LO2肝细胞（简称LO2细胞）作用的比较，研究AHCSE对肝癌的作用以及探讨其可能的作用机制。方法 应用光学显微镜、透射电镜、MTT法、TUNEL、FCM等方法观察7404细胞、LO2细胞经过AHCSE、5-FU处理后，细胞形态学、生物化学等方面的变化。结果 7404细胞、LO2细胞经过AHCSE、5-FU处理后，发生了形态学改变；小剂量AHCSE对7404细胞具有很强的抑制作用，但对LO2细胞几乎无影响；随着剂量的加大，AHCSE对7404细胞抑制率上升不明显，但是出现对LO2细胞的抑制作用。经AHCSE作用后，7404细胞发生了凋亡，凋亡率随AHCSE浓度的增加而增加；与5-FU对7404细胞作用相似，但5-FU对LO2细胞抑制作用明显增强。结论 AHCSE、5-FU对BEL-7404细胞均有很强的抑制作用，诱导细胞凋亡是其作用机制之一，AHCSE可能成为一种新的肝癌细胞凋亡的诱导剂。 【关键词】 蛇毒抗高凝状态酶；细胞凋亡；肝细胞癌；肝细胞 【Abstract】 Objective To investigate the efficacy of antihypercoagulability state enzyme (AHCSE) and 5-FU on human hepatocellular carcinoma BEL-7404 cells， normal hepatocellular LO2 cells and probe into its function.Methods MTT.Phase-contrast-microscope， electron-microscopy， terminal deoxynucleotidy transferase dUTP nick and labeling (TUNEL)， flow cytometer (FCM) were conducted to observe the alteration of cell form， biochemistry variety of the AHCSEed cells (or the 5-Fued cells) of BEL-7404 cells， LO2 cells.Results The AHCSEed cells of BEL-7404， altered in their cells forms.The low dosage AHCSE had a very strong inhibition to BEL-7404 cells， nearly no efficacy on LO2 cells.With the dosage increase the rate of inhibition to BEL-7404 cells did not rise markedly， but an inhibition to LO2 cells appeared. After the action of AHCSE apoptosis took place in BEL-7404 cells， the apoptosis index increased with the increase of the dosage. It is very like 5-FU， but 5-FUthan AHCSE’s.Conclusion The AHCSE /5-FU have very strong inhibition to the BEL-7404 cells. Inducing apoptosis is one of its functions. The AHCSE may possibly become a new kind of drugs that induce apoptosis. 【Key words】 antihypercoagulability state enzyme；apoptosis；hepatocellular carcinoma；hepatocellular 蛇毒作为一种天然的药用资源，含有许多活性成分。大量资料显示，蛇毒很多组分对肿瘤有很好的抑制作用。我们从皖南山区蝮蛇粗毒中提取一种抗高凝状态酶（antihypercoagulability state enzyme，AHCSE），发现其对实验性肝癌有很强的抑制作用［1，2］，本实验进一步以B