提高冷冻切片制片质量的方法探讨.pdfVIP

处理，收到了较好的制片效果，使癌细胞的检出率明显提高。(1)十六烷基三甲基溴化铵的外观为白色粉 末状，易溶于水、乙醇和异丙醇，为阳离子表面活性剂，具有增溶作用，对细胞膜上的脂类有特殊作用。 它作为溶血剂被广泛用于血细胞分析仪中，该试剂无毒、稳定、易于保存【l’2】。当血性胸腹水标本与溶血 剂充分作用后，红细胞即溶解破坏。该溶血剂溶血速度快，对红细胞处理较完全，涂片背景干净，有利于 细胞学的病理诊断与分类。(2)该溶血剂对肿瘤细胞及正常细胞均具有较好的保护作用，可使癌细胞染色 清晰，结构保存完好，且可使癌细胞聚集，对胃癌、肠癌、肺癌及肝癌等疾病的细胞学诊断具有较高使用 价值。(3)加入溶血剂的量，要根据标本中含血量的多少而定。一般情况下，5一lOml血性胸腹水标本加 5一lO滴溶血剂较好。(4)使用此法处理的涂片进行免疫组化染色可消除由于红细胞染上红褐色，而造成假 阳性的现象。(5)此溶血剂配制简单、操作步骤方便，除有溶血作用外，同时还兼有固定、保湿、消毒和 杀菌作用。 参考文献 谷小林，彭明婷，陈宝梁．十六烷基三甲基溴化铵溶血剂的探讨(J)．临床检验杂志，1994，12(2)：65．68． 彭毅，魏明竞．国内对血细胞分析仪用溶血剂的研究评价(J)．重庆医学，1995，24(3)：179．180． 提高冷冻切片制片质量的方法探讨 田玉旺李琳朱红艳邢宜苗金红 (北京军区总医院病理科，北京100700)． 【关键词】冷冻切片；质量；探讨 术中冷冻切片诊断是病理科的急诊工作，其重要性和责任性都很大。其中冷冻切片质量的好坏至关重 要，它是许多病理技术人员一直探讨的问题。本文对影响制片质量的各种因素及环节进行了分析，并提出 了可行的防范措施，使制片质量明显提高。 一、材料与方法 1．标本选取我院手术中的各种活体组织标本。 2．仪器德国徕佧一1900型冷冻切片机。 3．方法冷冻切片方法和染色方法基本同常规，切片厚59m。 二、结果 在整个制片过程中注意文中所述细节后，制片质量明显提高，组织结构清晰，核浆染色鲜艳，组织内 冰晶明显减少。 三、讨论 影响冷冻制片质量的因素较多，我们经大量实验及实际应用，认为在整个制片过程中应注意以下细节。 1．做好前期准备工作 1．1日常工作中，仪器要定期进行擦拭、除霜、清洁消毒等，使冷冻切片机始终处于良好的运行状态。 1．2切片刀要定期进行更换，调整好切片刀的角度，刀头刀架不要松动，不同的组织可使用不同刀片，一 般组织选用R．35型，较硬的组织，如宫颈组织、子宫肌瘤等，使用A．35型较好。防卷板调整到最佳位置， 219 防卷板要注意清洁，避免切片污染和切片出现皱褶。在切片过程中，尽量不要随意调整切片刀的角度和防 卷板的位置，以免延长制片时间。 1．3试剂及染液要定期进行更换，以保证染色质量。 2取材方面 标本取材大小要合适，因为组织冷冻速度的快慢，依赖于温度、组织的大小及厚薄，取材大小一般为 1．5x1．5×0．3cm为宜。取材时，尽量避开组织坏死出血区，要尽量剔除脂肪、毛发、骨及钙化物：取材时注 意干燥，取材工具尽量不要接触水，囊性组织内有很多液体，取材时不要用水冲洗；若组织标本表面附着 大量粘液或血液需用纸巾擦试干净，不能用水冲洗。取材用的刀剪应当锋利，取材时避免刀来回挫动挤压 组织。 另外，术中组织送检要及时，以保证标本新鲜。冷冻切片标本不要浸入酒精、生理盐水和甲醛液内； 需要术中进行快速病理诊断的活检组织，最好用一次性塑料或乳胶手套盛放，切忌用干纱布、卫生纸或干 棉花包裹组织，以免纱布等上面的线毛粘在组织上，不利于制片，且易损伤刀刃。 3冷冻条件的设置 冷冻切片是借助在低温的条件下，使组织迅速冻结达到一定硬度进行切片的一种方法。一般工作时间 内，箱体的温度设在．20℃左右，非工作时间设在．15(2左右较好。由于各种组织的结构不同，适宜的切片 条件也有所不同。控制好冷冻组织的温度和冷冻时间是制作优质切片的关键。 3．1肝脏、脾、脑、肾脏、甲状腺组织、淋巴结等细胞较丰富，纤维组织较少的标本，冷冻室温度一般控 制在．16℃～．18℃左右，冷冻时间应当缩短，否则组织变脆、易碎，镜下形成裂隙，破坏了组织结构，影 响诊断。冷冻时间控制在lmin左