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蓝色：已改过的 黄色：增加的 第三章 有机污染物降解酶的研究 1 半纤维素酶 张世敏等（2001）以52个霉菌菌株产生纤维素酶和半纤维素酶能力高低作为评价指标,经初筛?复筛和降解配方筛选,得到了比较好的秸秆降解菌制剂配方M1M5M19,其纤维酶和半纤维素酶酶活性分别达到3908μmol·min·g-1和2875μmol·min·g-1,通过模拟大田试验进行了验证?研究了蔬菜垃圾好氧处理过程中,纤维素降解菌和半纤维素降解菌(细菌和真菌),纤维素酶活和半纤维素酶活,和有机物降解之间的变化规律?方法:用添加纤维素和半纤维素的牛肉膏蛋白胨培养基和查式培养基,分别培养计数纤维素降解细菌?真菌和半纤维素降解细菌?真菌;4d有机物日均降解率5.2%,后3d日均降解率2.2%?叶劲松2007)研究为结论:半纤维素降解菌的数量比纤维素降解菌的多,半纤维素酶活力,也高于纤维素酶活力;微生物的变化情况为前6d产两种酶的微生物主要有细菌和真菌;从第6d开始真菌快速生长;至第7d真菌纤维素酶和半纤维素酶活力显著升高? 2 扁桃酸脱氢酶 从土壤中分离得到一株(R)-扁桃酸选择性降解菌,经鉴定为恶臭假单胞菌,保存于中国普通微生物保藏中心,编号为CGMCC1388?考察了扁桃酸及其降解产物对扁桃酸脱氢酶活力的影响?研究表明,在培养基中添加少量扁桃酸?苯甲酰甲酸或苯甲酸均可显著提高其产量,以扁桃酸的诱导效果最佳?3种诱导物的最适添加质量浓度分别为4?4和2 g/L?当以消旋扁桃酸为反应底物时,该菌可高选择性降解(R)-扁桃酸,回收得到的(S)-扁桃酸对映体过量值(e.e.)高于99%,反应的对映选择率(E)达130?用静息细胞催化扁桃酸降解的最适温度和pH分别为30℃和6.0,最适底物浓度为60 mmol/L,以双倒数法求得Km为47 mmol/L?黄汉荣(2005)考察了该菌对扁桃酸苯环取代衍生物的生物转化,并以高产率制备获得高对映纯度的(S)-对羟基扁桃酸和(S)-对氯扁桃酸? 3 单宁酶 任平(2007)从石榴皮?石榴茎叶?石榴土壤中经初筛分离纯化出17株产单宁酸酶菌株,并对菌株的菌落特征和COD去除率进行了研究和测定?结果表明:产酶菌株以从查氏中性培养基里分离出来的居多(15株);菌株多为黑色霉菌;菌株的水解圈与菌落直径比均在1.0-2.0之间;水解圈直径越大的菌株COD去除率越高,水解圈为透明状态的菌株COD去除率越高;通过对菌株菌落形态特征的观察及菌株COD去除率的测定,筛选出7#(查中皮3-3)?9#(查中皮4-3)为目标菌株? 4 单宁酸酶 本实验从香蕉茎叶?茶叶及香蕉土壤?茶土壤环境中经初筛和复筛分离纯化出16株产单宁酸酶的菌株,对其菌株的外在特性和产酶活力进行了研究和测定?结果表明,从培养基来看,产酶菌株以从牛肉膏蛋白胨中性培养基里分离出来的居多(11株);从原料来源看,以从茎叶分离出的菌株居多(14株);菌株多为棕或绿色霉菌(15株);水解圈以透明的居多(10株),且16株菌株的水解圈与菌落直径比均在1.0.2.0之间?宋志萍(2005)产酶菌株的酶活和水解圈的透明状态基本相符;其中以牛中香茎处10?牛中香茎处100-2?牛中香茎处100-6等3株的酶活值最大,为3.4? 5 多酚氧化酶 周长路2001)研究了多孔菌(Polyporus)多酚氧化酶的产酶曲线及酶作用最适条件;结果在该培养条件下,多孔菌第12d达产酶高峰,峰值酶活为529u/ml,酶作用的最适pH值为6.0,最适酶解温度为30℃,Mg2+对漆酶有激活作用,而Ag+?Cl-则能明显抑制漆酶活性?以少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株为对象,通过酶活检测和PAGE活性染色,研究了以菲为代表的多环芳烃对细胞内多酚氧化酶的影响结果表明,经菲诱导后,ZX4菌株多酚氧化酶的活性和组成都发生了明显变化李钠(2006)同时当尼古丁降解菌HF-1菌株?HF-2菌株和烟焦油降解菌MR4菌株受相应污染物诱导后?用褐藻酸降解菌侵染海带并跟踪了侵染过程中海带的超微结构变化,同时测定了海带体内多酚类化合物含量和多酚氧化酶活性的变化?结果表明,色素体是海带头受侵染初期最为敏感的细胞器?黄健等(2002)在侵染初期,海带细胞的亚显微结构受伤害较轻,多酚类化合物含量表现为骤然升高,推测多酚类化合物是海带体内的重要化学防御物质,并且此积极防御发生在初期? 6 儿茶酚双加氧酶 从恶臭假单孢菌(Pseudomonas sp. S-47)的DNA中扩增得到924bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段,将其构建入pBluescript SK载体BamHI和SacI位点间.测序结果显示与Kim(2000)报道一致将该基因插入带庆