新结构类型化合物调血脂分子药靶探究.pdfVIP

生垦垫墅重迅墨Q!!生箜三土丛鲞筮三塑 d 达峰；铜离子在I／R后第7d才有显著性增加，并且为最高值；而铝离子最晚，在I／R后第15 升高才有显著性(但也有可能是在7—15d已明显升高，由于取样点的关系未能发现)。所有测 定的金属离子在再灌注第30d时已下降，但仍明显高于假手术组。全脑缺血再灌注组大鼠皮层 组织中金属离子铁、锰、铝、铜、锌水平升高的幅度也各不同。铜离子的峰值约为假手术组的 1．3倍；铁离子约为假手术组的1．4倍；铝离子约为假手术组的1．7倍；锰离子约为假手术组的 果提示全脑缺血再灌注损伤可导致大鼠皮层金属离子铁、锰、铝、铜、锌的含量均明显增加， 其升高的机制不清楚，需要进一步深入研究。 新结构类型化合物调血脂分子药靶探究 朱海波 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050 高脂血症是脑卒中、冠心病、心肌梗塞、心脏猝死的重要危险因素，也是高血压、糖尿病 发生的主要诱因。新结构新机制调血脂药物的研发是国际制药领域基础和应用研究的热点课题。 本研究采用多种技术和手段对源于天然产物的新结构类型化合物WS070117调血脂作用机 制进行系统探究，以期揭示与传统调血脂药物结构类型不同的新结构化合物分子靶点，为其新 药开发提供依据。 以自主建立快速蛋白分离和荧光标记技术证实：在啮齿类动物中，金黄地鼠和apoE_／一小鼠 的血脂蛋白谱与人类最为接近。新结构类型化合物WS070117能明显降低高脂血症金黄地鼠血 浆胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL--C)水平。 超声影像学和油红染色病理结果均显示WS070117改善动物肝脏脂肪变性。高分辨魔角探 头检测则发现该化合物不仅能够降低血中大分子低密度脂蛋白含量，而且有增加血浆和肝脏中 内源性小分子物质如牛磺酸、甜菜碱等心血管保护物质作用。 用，且能直接抑制人源化LDL氧化过程。 液质联用和微量核磁共振波谱技术研究表明WS070117进入体内经酯酶水解很快转化为代 谢产物M1，MI可进一步加合Ⅱ相基团(葡萄糖醛酸和磺酸)随胆汁和尿液排出体外。M1腹 见上述作用。上述结果表明M1是WS070117进人体内的活性代谢产物。 分子生物学和同位素测定技术表明M1对传统降血脂药物作用靶点(HMG—CoA还原酶、 60 中国药理通讯2011年筮三±八鲞第二翅 了上述观点。采用国际通用的AMPK活性检测方法——32P标记技术，分别从分子、细胞和动 分子水平M1及WS070117激活AMPK强度不如细胞水平提供依据。 受阻，AMPK特异性抑制剂Compound 使细胞内AMPK活性升高，促进其信号下游分子元件活性改变，从而发挥调血脂作用。 抑制动脉粥样硬化发生中扮演重要角色。 新结构类型调血脂化合物与靶蛋白AMPK分子问相互作用初步解析 李瑾朱海波 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京 100050 热点。 用方式。采用国际通用的AMPK活性检测方法——32P标记技术，分别从分子、细胞和动物水 平证实WS070117增加AMPK活性。 结合，等温滴定量热实验结果证实了上述观点。表面等离子共振实验从动力学角度阐明 WS070117与AMPK7亚基结合模式为快速结合快速解离，平衡解离常数在肛M级。 结构改变，a螺旋含量减少13．5％，苯丙氨酸构象发生改变。核磁共振波谱实验从小分子化合 物结构角度说明WS070117嘌呤环、乙酰基和苯环上的氢与AMPK7亚基有相互作用。 激活AMPK分子作用机制提供实验依据。 61