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超临界二氧化碳萃取迷迭香中迷迭香酸的工艺研究_药学论文.doc
超临界二氧化碳萃取迷迭香中迷迭香酸的工艺研究_药学论文
超临界二氧化碳萃取迷迭香中迷迭香酸的工艺研究_药学论文
作者:陈四利,张冲,李嘉诚,冯玉红 张亚男,张德拉
【摘要】 目的研究萃取迷迭香中迷迭香酸的优选工艺条件。方法利用超临界CO2流体萃取技术,设计4因素3水平正交实验,结合高效液相色谱法对迷迭香酸进行定量分析。结果确定优选工艺条件为:萃取压力40MPa,萃取温度65℃,萃取时间1 h,夹带剂(乙醇)用量为0.60 ml·g-1。 结论该方法可靠性高、简便,可用于迷迭香中迷迭香酸的提取。
【关键词】 超临界CO2萃取; 高效液相色谱; 迷迭香
Abstract:ObjectiveTo study a new extraction process of components from Rosmarinus officinalis L. MethodsBy supercritical CO2 fluid extraction (SFE- CO2). The content of rosmarinic acid in the extract was tested by HPLC. ResultsThe optimum extraction process conditions were as follows: keeping pressure at 40 MPa and temperature at 65℃ for 1h, in the same time adding alcohol 0.60 ml·g-1. CondlusionThe established method is simple and reliable for the extration of rosmarinic acid in Rosemarinus officinalis L.
Key words:Supercritical CO2 fluid extraction; HPLC; Rosmarinus officinalis L.
迷迭香Rosmarinus officinalis L.,系唇形科(Labiatae)迷迭香属植物。原产地中海地区,现在世界各国广泛栽培。1981年由中国科学院植物研究所北京植物园引入我国[1]。目前,我国南方已广为栽种。迷迭香酸是在1958年由Ellis首次从迷迭香中分离得到,主要存在于唇形科﹑紫草科﹑葫芦科﹑椴树科﹑伞形科的多种植物中[2],是一种天然抗氧化剂,具有抗炎、抗血栓、抗血小板凝集、抗病毒和抗菌等活性[3],而且有很好的自由基清除和抗氧化作用,能抑制内皮细胞调节的低密度脂蛋白的氧化[4]。在药物应用上,德国Nattermann公司已将迷迭香酸作为解热、镇痛、抗炎药在市场上销售[5]。迷迭香酸属多酚类化合物,结构不稳定[6],并且目前从迷迭香中提取迷迭香酸常用有机溶剂法,方法非常繁琐,通常还会有溶剂残留。超临界萃取技术是一种集提取、分离、浓缩为一体的新技术[7],具有工艺过程简单、选择性强、无溶剂残留、不破坏物质活性等优势。
本实验采用超临界CO2萃取技术,通过设计正交实验优选萃取工艺,并用高效液相色谱法对萃取物中的迷迭香酸进行定量分析。
1 器材
1.1 仪器Spe- ed超临界萃取仪(美国ASI);Waters高效液相色谱仪:Waters 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector(美国Waters);超声波清洗器(大连华洋科技有限公司);LABOROTA 4000旋转蒸发仪(德国Heidolph);电子天平(SHIMADZU)。
1.2 材料 迷迭香(购自福建);液体CO2(广东佛山科的气体公司);迷迭香酸对照品(纯度97%,天津一方科技有限公司);甲醇(色谱纯,美国TEDIA);甲酸,乙醇(分析纯,广州化学试剂厂);双蒸水。
2 方法
2.1 超临界CO2萃取超临界萃取受很多因素的影响,根据设备情况,选取萃取压力、萃取温度、萃取时间、夹带剂4个对萃取效率有较大影响的因素,设计4因素3水平正交实验,以优选超临界CO2萃取迷迭香酸的工艺参数。因素水平表见表1。
表1 正交实验因素水平(略)
称取100 g迷迭香干叶,装入萃取釜,在一定压力和温度下进行超临界CO2萃取,以乙醇作为夹带剂,萃取完毕,收集萃取物,备用。
2.2 迷迭香酸测定方法
2.2.1 色谱条件色谱柱Waters C18(3.9 mm×150 mm);流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(45∶55 V/V),流速1.0 ml/min;波长330 nm,AUFS 1.000 0,柱温25℃。
2.2.2
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