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铅暴露大鼠脑不同区域NMDA受体亚基（NR1、NR2A、NR2B）表达的研究_医学论文 铅暴露大鼠脑不同区域NMDA受体亚基（NR1、NR2A、NR2B）表达的研究_医学论文 【摘要】 观察铅暴露大鼠中不同脑区NMDAR1（NR1）、NMDAR2A（NR2A）和NMDAR2B（NR2B）亚基蛋白和mRNA水平的表达情况。方法：采用Western Blot及RT技术，测定NR1、NR2A和NR2B亚基蛋白和mRNA在铅暴露大鼠脑中额叶皮质、新小脑、海马及纹状体中的表达情况。结果：铅暴露大鼠中NR1、NR2A和NR2B亚基的蛋白水平和mRNA表达在各个脑区均有不同程度的下调。结论：在铅暴露大鼠的额叶皮质、海马、新小脑和纹状体中，NMDA受体亚基NR1，NR2A和NR2B的表达在mRNA水平就已经发生了改变。 【关键词】 NR1亚基 　　ＡｂｓｔｒａｃｔObjective：To investigate the change ofNMDAR1（NR1）,NMDAR2A（NR2A）and NMDAR2B（NR2B）subunit expression in the different brain region of plumbum exposure rat.Methods:Western blot technique and RT-PCR technique were used to determine the expression of NR1,NR2A and NR2B subunit protein and mRNA expression in Pb exposure rats brain cortex of frontal lobe, neocerebellum, hippocampus and corpora.Results:The levels of NR1, NR2A and NR2B subunit protein and mRNAs expression in different regions of the brain from Pb exposure rats had different degree down regulation. Conclusion:The expression of NMDA receptor subunit NR1,NR2A and NR2B had changed at mRNA level in the cortex of frontal lobe，neocerebellum，hippocampus and corpora striata from Pb exposure rats. 　　Key wordsAlzheimers disease ( AD) NR1 subunit NR2A subunit NR2B subunit N-甲基-D-天门冬氨酸（N，NMDA）受体是离子型谷氨酸（Glutamatic acid）受体的一个亚型，通过对其药理、生理、病理等方面的研究已经证实，NMDA受体在生物发育过程中有着重要的生理作用，可调节神经元的活性，树突、轴突结构的发育及突触可塑性等，在神经元回路的形成及学习和记忆的突触机制中，NMDA受体也起着关键作用[1～4]。正常神经系统的发育需要兴奋性氨基酸受体活性处于最佳水平，如果NMDA受体活性过低则可能使发育延迟，而活性过高又可能导致神经元损伤或脑损伤[5～7]。本研究采用了铅暴露大鼠模型，研究NMDA受体在铅暴露大鼠学习记忆障碍中的变化，探讨其可能的机制。 　　1材料与方法 　　1.1 动物及模型制备40只一月龄Sprague（SD）大鼠由沈阳医学院实验动物中心提供，雌雄不拘，体重（120±15）g，随机分成5组，各8只。铅暴露组分饲0.1%、0.2%、0.5%、1.0%用蒸馏水配制的醋酸铅溶液，对照组给予蒸馏水。3周后娩出子鼠，子鼠21天起断乳，喂以母鼠相同的饮水并单独饲养。当母鼠18个月龄时，采用朱启文等先前报道过的大鼠多功能行为训练装置[8]，在术前及术后14d开始被动回避反应（passive avoidance response，PAR）训练。将铅暴露大鼠模型合格者处死取脑标本进行下列实验。 　　1.2 方法 　　1.2.1 Western Blot 分析 　　（1）试剂：NR1、NR2A多克隆抗体购于santa cruz公司；NR2B购于博士德生物工程有限公司；辣根过氧化物酶标记兔抗羊和羊抗兔抗体购于中山公司。（2）样品处理：取大鼠不同脑区标本，切取一部分，裂解脑组织提取总蛋白。上样，电泳，湿转至PVDF膜上，5%脱脂奶粉封闭。将PVDF膜在置于4℃NMDA受体杂交液（1：500）中摇床过夜，然后在过氧化物酶标记二抗（I