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颗粒状角膜营养不良家系的BIGH3基因突变_医学论文 颗粒状角膜营养不良家系的BIGH3基因突变_医学论文 作者：阳菊华, 童绎, 朱益华, 肖继勇, 陈贻锴, 林建银 【关键词】 角膜营养不良,遗传性,基因,突变,序列分析,DNA,聚合酶链反应,系谱 　　摘要:目的 以基因突变分析一角膜营养不良家系的致病分子基础。方法 应用PCR产物直接DNA测序及限制性内切酶分析检测家系中7例患者和6例表型正常成员的K3、K12和BIGH3基因突变情况。结果 该家系患者成员在K3与K12基因的编码序列区没有发现突变,而BIGH3基因外显子12存在CGGgtTGG(R555W)突变杂合子,家系表现正常成员及正常对照均无BIGH3基因突变限制性内切酶分析结果显示突变与疾病表现型呈完全共分离。结论　利用基因突变分析确诊我国首例报道的Meesmann角膜营养不良家系属于颗粒状角膜营养不良,且为BIGH3 R555W杂合突变类型。 　　关键词: 角膜营养不良,遗传性 基因 突变 序列分析,DNA 聚合酶链反应 系谱 　　ABSTRACT: Objective Molecular genetic analysis of a large Chinese corneal dystrophy kindred. Methods Thirteen individuals including seven affected and six unaffected family members in this granular corneal dystrophy kindred were studied. Genomic DNA was purified from blood peripheral leukocytes. All of the exons of both the Keratin3 and the keratin12 genes, and the exon 4 and exon 12 of BIGH3 gene were amplified using polymerase chain reaction(PCR), followed by direct bidirectional sequencing for mutation detection. 　　The mutation was confirmed by restriction digest analysis. Results Direct sequencing of the patients genomic DNA revealed there was no mutation in all of the exons of K3 and K12 genes, but a missense mutation(CGGgtTGG) in the exon12 of BIGH3(R555W) was found. This mutation in this family completely cosegregates with the disease phenotype. Conclusion This kindred was diagnosed with granular corneal dystrophy harbored a heterozygous R555W mutation of the BIGH3 gene. 　　KEY WORDS:corneal dystrophy,hereditary genes mutation polymerase chain reaction 　　基金项目: 福建省自然科学基金资助项目(C0510009),福建医科大学科学研究发展基金资助项目(FJGXY04020) 　　角膜营养不良(corneal dystrophy)是一组与遗传有关的原发性、具有病理学组织学特征的疾病。目前,已确定与角膜营养不良的致病基因有BIGH3、CHST6、K3、K12、M1S2和GSN等。BIGH3基因突变至少可导致4种类型的角膜营养不良,包括颗粒状角膜营养不良(R555W)、Avellino角膜营养不良(R124H)、格子状角膜营养不良(R124C)和ThielBehnke角膜营养不良(R555Q)[1]。K3和K12基因突变导致Meesmann角膜营养不良[2]。笔者研究的家系为福建医科大学附属第一医院眼科普查时发现，先证者在裂隙灯下检测可见双角膜中央区有散在的细小圆形小泡,位于上皮层,斜照时呈散在的灰白点状,后照亮下呈透明小气泡样,临床表现为Meesmann角膜营养不良[3]。2004年,笔者随访该家系,家系图谱表现为常染色体显性遗传在裂隙灯下检测先证者,发现不仅角膜上皮层