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风湿性心脏病心房纤颤和非心房纤颤患者心房肌细胞内钙离子浓度变化_医学论文.doc
风湿性心脏病心房纤颤和非心房纤颤患者心房肌细胞内钙离子浓度变化_医学论文
风湿性心脏病心房纤颤和非心房纤颤患者心房肌细胞内钙离子浓度变化_医学论文
作者:周更须 梁延春 张荣庆 贾国良 蔡振杰 【关键词】 心房颤动
关键词: 心房颤动风湿性心脏病钙Fluo-3
摘 要:目的 观察风湿性心脏病(RHD)心房纤颤(AF)患者心房肌细胞内是否存在Ca2+ 超载. 方法 急性分离RHD伴AF和非AF患者的心房肌细胞,用Fluo-3作为钙指示剂,用共聚焦显微镜测定细胞内Ca2+ 浓度. 结果 AF组心房肌细胞内Ca2+ 浓度明显高于非AF组心房肌细胞内Ca2+ 浓度(517±98)nmol L-1 vs(262±65)nmol L-1 ,两组间差异显著(0.01). 结论 RHD伴AF患者心房肌细胞内存在Ca2+ 超载.
Keywords:atrial fibrillationrheumatic heart diseasecalci-umFluo-3
Abstract:AIM To observe whether Ca2+ overload exists in atrial myocytes of rheumatic heart disease patients with atrial fibrillation.METHODS Atrial myocytes of rheumatic heart disease patients with and without atrial fibrillation were a-cutely isolated.Intracellular Ca2+ concentration was mea-sured with the fluoresent Ca2+ indicator Fluo-3and laser scanning confocal microscopy.RESULTS Intracellular Ca2+ concentration of atrial fibrillation group was significantly higher than that of non-atrial fibrillation group [(517±98)nmol L-1 vs(262±65)nmol L-1 )].CONCLUSION Ca2+ overload exists in atrial myocytes of rheumatic heart disease with atrial fibrillation patients.
0 引言
Wijffels等[1] 对山羊心房纤颤(atrial fibrilla-tion,AF)模型的研究提示,AF的心房有效不应期缩短,我们[2] 及Daoud等[3] 对阵发性AF患者的研究得到了同样的结论,这种心房肌电生理特性改变的现象称为心房肌电重构(atrial electrical remodeling,AER).该AER在AF的发生及维持中起着十分重要的作用.Dauod等[3] 和Tielieman等[4] 的研究还发现,应用钙离子拮抗剂维拉帕米能有效地预防和减轻AER,推测心房肌细胞内钙超载可能是AER的原因.但这一推测尚无直接证据.我们应用激光共聚焦显微镜技术定量测定风湿性心脏病(rheumatic heart disease,RHD)AF患者心房肌细胞内钙离子浓度,检验该类患者心房肌细胞内是否存在钙超载.
1 材料和方法
1.1 试剂和溶液[5] Tyrode液(mol L-1 ):NaCl126.0,KCl5.4,MgCl2 0.8,CaCl2 1.0,NaH2 PO
4 0.33,HEPES10.0,Glucose5.5.无钙Tyrode液按Tyrode液配方不加CaCl2 .Fluo-3/Am(美国BIO-RAD).胶原酶(日本Yakult).蛋白酶XXIV(美国Sigma).牛血清白蛋白(美国Amerco).
1.2 病例及分组 所有病例均为1999-01/1999-05来我院行心脏外科手术的患者.实验组:RHD伴有AF(n=8,男3,女5),平均年龄(44±9)岁.对照组:RHD不伴有AF(n=6,男2,女4),平均年龄(43±10)岁.2组间年龄无显著差异(Pgt0.05),2组患者心脏瓣膜病变情况大致相同,均无充血性心力衰竭,均为二尖瓣中-重度狭窄伴中-重度返流并行二尖瓣膜置换手术.实验组AF病程为(13.1±6.4)mo.
1.3 单个人心房肌细胞的分离[6] 将手术中获得的小块右心耳组织迅速置于预先氧合30min的无Ca2+ Tyrode液
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