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高孔隙率滨珊瑚用于组织工程骨的构建_医学论文.doc
高孔隙率滨珊瑚用于组织工程骨的构建_医学论文
高孔隙率滨珊瑚用于组织工程骨的构建_医学论文
作者:席庆 毛天球 曹罡 陈富林 杨维东
【关键词】 骨髓细胞
关键词: 珊瑚骨髓细胞支架生物相容性材料
摘 要:目的 探讨西沙群岛高孔隙率滨珊瑚作为骨组织工程支架材料的可行性,为组织工程研究开辟新的途径. 方法 取4wk龄兔骨髓,分离骨髓基质细胞,体外培养,经诱导分化为成骨细胞,接种至滨珊瑚材料,无菌条件下植入裸鼠皮下组织中.对照组单纯植入滨珊瑚.分别于4,8wk取材,行大体观察、X线摄影及组织学染色,观察新骨形成情况. 结果 4wk时X线片有高密度阻射影像,HE染色可见有新骨形成8wk时X线阻射影像密度更高,HE染色可见大量新骨形成并相互连接成骨小梁样结构,骨细胞位于陷窝中. 结论 高孔隙率滨珊瑚可以作为骨组织工程的支架材料并有广阔的应用前景.
Keywords:coralbone marrow cellsstentsbiocompatible materials
Abstract:AIM To investigate the feasibility of using coral as scaffolds in bone tissue engineering.METHODS The marrow stromal cells from New Zealand rabbits of4months were harvested and cultured in vitro.After multiplied,dex-amethasone was used to promote the osteoblastic phenotype of the cells.The cells were harvested and then seeded into coral.By means of tissue engineering,osteoblastic cells/coral complexes were formed.The complexes were implanted subcutaneously in nude mice and coral alone was implanted as the control.Bone regeneration was assessed by histological and roentgenographic analysis4and8weeks after the im┐plantation.RESULTS Osteoid tissues were observed4weeks after the implantationlarge amount of new bone was found8weeks after the implantationlamellar bone was ob-served,and many osteoblasts could be seen in the bone ma┐trix.CONCLUSION The coral with higher porous rate can be used as a good scaffold material for bone tissue engineer-ing.
0 引言
组织工程学是应用细胞生物学和工程学的原理,研究和开发用于修复和改善人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的一门科学[1] .骨的再造及骨缺损修复是组织工程领域的一个重要研究内容,支架材料研究是其中重要的组成部分.我们通过研究骨髓基质干细胞与材料的粘附及成骨能力,探讨国产滨珊瑚(Porites)用于组织工程的可行性.
1 材料和方法
1.1 材料 DMEM培养液(Gibco),胎牛血清(浙江金华清湖犊牛利用研究所),胰蛋白酶(Sigma),β-甘油磷酸钠(Sigma),地塞米松(Sigma),L-抗坏血酸(Sigma),S-520扫描电镜(日本).CO2 培养箱(美国),YJ-875型超净工作台(苏州净化设备厂),倒置显微镜(Olympus),新西兰家兔(第四军医大学实验动物中心),BALB/c裸鼠(第四军医大学实验动物中心)16只,18~22wk龄,雌雄不拘.滨珊瑚(西沙群岛),孔径170~220μm,孔隙率40%~50%,切割成直径15mm,厚度2mm大小的盘状材料,50g#12539L-1 次氯酸钠浸泡3d,流水冲洗过夜,用蒸馏水超声漂洗,烘干后备用.
1.2 方法
1.2.1 取材 新西兰家兔1只,4wk龄,无菌条件下取双侧髂骨,减碎成约2mm×2mm×2mm大小的组织块,用20
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