高效液相色谱法同时测定银杏叶提取物中5种黄酮类成分_医学论文.docVIP

高效液相色谱法同时测定银杏叶提取物中5种黄酮类成分_医学论文 高效液相色谱法同时测定银杏叶提取物中5种黄酮类成分_医学论文 【摘要】 目的 建立反相高效液相色谱法同时测定银杏叶提取物中5种黄酮类成分芦丁、槲皮苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量。方法 采用70%甲醇提取样品，以Kromasil C18为固定相，甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相，线性梯度洗脱，流速1.0 ml/min；柱温：40℃；检测波长：360 nm；结果 芦丁、槲皮苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素的定量限分别为0.03、0.02、0.008、0.006、0.005 mg/L，芦丁、槲皮苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素分别在2.02～50.5、1.932～48.3、2.01～50.4、0.49～12.3、0.39～9.8 mg/L浓度范围内其峰面积与浓度的线性关系良好（r＞0.9992），回收率为86.5% ～99.2%，日内精密度及日间精密度的变异系数分别小于2%、3%。结论 本方法简单、准确，为银杏叶提取物中黄酮类成分的质量控制提供了依据。 【关键词】 高效液相 银杏叶提取物 Abstract: Objective To describe a high performance liquid chromatographic (HPLC) method to quantitate five flavonol components in the extract of Ginkgo biloba (EGb). Methods The five flavonols of EGb were extracted with 70% methanol and separated by passing through a kromasil C18 column (250×4.6 mm, 5μm ) at 40℃ with a step linear gradient using methanol∶0.1% formic acid at a flow rate of 1.0 ml/min. Results The limits of quantitation for rutin, quercitrin, quercetin, kaempferol and isorhamnetin were 0.03, 0.02, 0.008, 0.006 and 0.005 mg/L, respectively. This method was linear over the concentration ranges of 2.02～50.5, 1.932～48.3, 2.01～50.4, 0.49～12.3 and 0.39～9.8 mg/L respectively（r＞0.9992）. The rates of recovery for the five components ranged 86.5%～99.2%, with the coefficient of precision being less than 2% within one day and less than 3% between two days. Conclusion The method is simple and accurate, and hence, can be validated as a means offering the basis for the quality control of flavonols in EGb . Key words: high performance liquid chromatography extract of Ginkgo biloba 银杏叶为银杏科植物银杏（Ginkgo biloba L.）的干燥叶［1］，其提取物（extract of Ginkgo biloba，EGb）是经现代提取工艺从银杏叶中提取的活性物质，其主要活性化学成分为两大类：黄酮类及萜类［2］。黄酮类成分包括单黄酮、黄酮醇苷、乙酰化黄酮醇苷、双黄酮、黄烷-3-醇类以及原花色素等，其中黄酮醇苷在银杏叶中含量最丰富，大部分黄酮醇苷结构已经通过其水解后的苷元如槲皮素、山奈酚、异鼠李素等得到证实［3］。 目前，银杏叶提取物及其制剂的质量控制多采用指纹图谱的方法进行［4-5］，国际上一般公认EGb质量指标为含黄酮24％以上、内酯6％以上。国内药厂生产的银杏叶制剂多以总黄酮的含量来控制其质量［6-7］。为实现其质量可控，许多学者以黄酮类成分如槲皮素、山奈酚、异鼠李素及内酯类成分如银杏内酯A、B、C等指标成分为对象进行研究。由于黄酮类化学成分具有很强的紫外吸收特性，因此其测定方法主要采用反相高效液相