K562白血细胞的固定与电化学性质研究.pdfVIP

第九届全国电分堑丝堂堂查叁婆笙窒塑茎竺 璺皇些兰竺塑堡壁曼皇竺塑坌堑垡堂 、 C5；K562白血细胞的固定及电化学性质研究 丁霖杜丹鞠烷先+ (南京大学化学化工学院，生命分析化学教育部重点实验室，南京210093) 细胞作为电化学活性体在电极上能给出明显的电化学伏安响应。采用合适的 方法将细胞固定在电极表面后，可以通过电化学方法研究其生长、发育、衰老等 生理过程，以及药物、环境对细胞的作用。本文利用戊二醛修饰的热解石墨电极， 固定混有金胶纳米粒子的K562白血细胞，建立了一种固定细胞的新方法。采用循 环伏安、交流阻抗等电化学方法研究了固定化K562细胞的电化学性质、细胞固定 过程中各个阶段的电子传递性质以及金胶对细胞固定和电子传递的作用。固定在 V出现一个明显的不可逆氧化峰。戊二醛与细胞 修饰电极上的K562细胞在+O．823 在电极表面对电子传递有一定的阻碍作用。金胶纳米粒子不仅能有效地保持细胞 活性，而且对细胞与电极表面的电子传递有一定的促进作用。进一步通过交流阻 抗法研究了电子传递电阻与细胞浓度的对数呈线性关系，为K562肿瘤细胞的定量 提供了一种新方法。 电极预处理及细胞固定 将抛光过的热解石墨电极用电化学方法活化后，浸入2％的戊二醛水溶液中， 在4℃冰箱中放置过夜。将细胞悬浮液离心，弃去上层清液后与金胶溶液混合均 匀，制得不同浓度的混有金胶的K562细胞溶液，滴加金胶．K562细胞混合溶液6 “l于戊二醛修饰电极表面，得到固定有K562细胞的电极。 结果与讨论 分别测定裸热解石墨电极(a)、活化热解石墨电极(b)、戊二醛／活化热解石墨电 极(c)、K562细胞．戊二醛／活化热解石墨电极(d)和混有金胶的K562细胞．戊二醛／ 7．4PBS中的循环伏安响应。由图1看出，裸电极背景 活化热解石墨电极(e)在pH 电流较低，基线较好。活化后电极及其戊二醛修饰电极背景电流变大，这是因为 电极表面上带电荷基团增加，增加了充电电流。固定细胞后，背景电流显著增大， 这也是因为电极的双电层厚度增加，电荷进一步增加的缘故。前四种电极在PBS 中都没有明显的氧化峰，当混有金胶后，K562细胞修饰电极于+0．823V出现一明 272 第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 C电化学生物传感器与生物分析化学 显的氧化峰。因此在细胞固定中，金胶纳米粒子在细胞膜上的电化学活性中心和 电极之间构建了电子传递的通道，使电子传递的过程更容易发生。重复扫描时峰 电流降低，反扫时无相应的还原峰，表明这是一个典型的不可逆电极过程(图1 附图)。 5 0 ‘5 { ： -10 ．15 ．20 1．2 1．O 0．8 0．6 0．4 0．2 0．O E／V(vs．SCE) 图l 7．4PBS中的循环伏安曲线。裸热解石墨 固定有K562白血细胞的热解石墨电极在pH 电极(a)，活化热解石墨电极(b)，戊二醛／活化热解石墨电极(c)，K562细胞．戊二醛／活化热 解石墨电极(d)。 mV／s。 混有金胶的K562细胞．戊二醛／活化热解石墨电极(e)，扫速为50 Electrochemical BehaviorsandImmobilizationofK562Leukemia