不同地区茶叶中绿原酸分布的HPLC探究.pdfVIP

首届中国中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 不同地区茶叶中绿原酸分布的HPLC研究 周莎 c18 摘 要：建立应用反相高效液相色谱法测定不同地区茶叶中绿原酸含量的方法；考察不同茶叶中绿原酸含量分布情况．色谱柱为Gemini x 50 (1 4．6，5um)。流动相乙腈一O．1％磷酸(0．1x三乙胺)-8：92．流速梯度洗脱，柱涅24℃，检测渡长323nm．绿原酸在0．625ug／ml一 40p 中绿愿酸含量的测定． 关键词：茶；绿原酸：高效液相色谱法：分布 茶叶是世界三大饮料(茶叶，咖啡，可可)之一，近年来，因其多种保健作用而受到广泛关注。 研究表明，饮茶可降低患癌症，心血管疾病的危险，还有抗炎，减肥等作用。茶叶中含有大量植物 二级代谢产物，如氨基酸，儿茶素，嘌呤碱，多酚，绿原酸等。其中，绿原酸(3．O．咖啡酰喹啉酸) 是咖啡酸和喹啉酸的缩酚酸1，具有抗炎2，清除自由基3，4，5，抗菌，抗病毒，抗肿瘤，升高白 血球，保肝利胆，将血压，降血脂，中枢神经系统兴奋等作用6。本试验考察了不同品种茶叶中绿 原酸的测定方法，并对13种市售常见茶叶中绿原酸含量进行了测定，通过考察不同产地，不同品种 茶叶中绿原酸含量i为绿原酸作为茶叶质量评价指标之一提供数据，并为各种茶叶保健作用及其适 饮性研究提供参考。 1仪器与试剂 1．1仪器： FA2004 万分之一电子分析天平(上海天平仪器厂)，TGL一16GAnke飞鸽牌高速离心机，GL．88B旋涡振荡器， 海门麒麟医用仪器厂，Branson200超声清洗机。(Branson CTUSA)。 pLtrasonicscorp．Danbury 1．2试剂和样品： 样品(均购余成都市百货大楼武侯商场)：羌山雀舌，四川省绵阳市佛泉茶厂：峨嵋苦丁，四川 省峨嵋山；峨嵋银针，四川省峨嵋山；珍珠茶，四川省成都市老茶客有限公司：香茶王毛峰，四川 省成都市香茶王茶叶有限公司；江苏碧螺春，江苏省宜兴市新征茶厂；莱莉花茶，四川省峨嵋山竹 叶青茶叶有限公司；御龙井，杭州御牌茗茶总公司(特级)。福建铁观音，福建省安溪县南成茶厂；福 建乌龙，福建省安溪县南成茶厂。云南小沱茶，云南省茶厂。祁门红茶，成都市茶叶有限公司。海 南苦丁，海南省千年苦丁。 对照品：绿原酸(供含量测定用)，中国药品生物制品检定所，110753．200212 司；超纯水：购于中科院成都分院西南物理研究所。磷酸，三乙胺，无水乙醇等其它化学试剂均为 分析纯。 217 首届中国中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 2方法和结果 2．1液相色谱条件和方法适应性试验 色谱柱Gemini 邻两峰分离度分别为1．7、2．3，符合含量测定要求。 表1．流动相流速梯度表 2．2标准曲线的制备 系列浓度标准液，分别取lOuL进样。以峰面积(Y)为纵坐标，浓度(x)为横坐标，进行线性回 归，得标准曲线方程：Y=6609．7X+1346．3，F 结果呈良好线性关系。 2．3提取方法考察 提取溶剂的选择：精密称取茶叶样品5份于25mL容量瓶，分别加入水、20％乙醇、50％乙醇、 小，结果表明以50％乙醇提取效果较好。 小，结果表明超声提取30rain提取效果较好。 抗氧剂考察：精密称取茶叶样品3份于25mL容量瓶，分别加入O．1％硫代硫酸钠，O．1％亚硫酸 氢钠，50％乙醇，超声30min，离心过滤，取续滤液lOuL进样，用t检验考察各峰面积／称样量值， 结果无显著性差异。 2．4重复性试验 精密称取高、中、低浓度样品各3份，按2．7项下操作，测定绿原酸含量，计算RSD分别为0．02％、 0．24％及0．19％。结果见表2。 表2重