昆明地区无偿献血者弓形虫感染地研究.pdfVIP

中国输血杂志2006年第19卷增}4中雹骑血协会第日届输血大拿} 昆明地区无偿献血者弓形虫感染的研究 来祥明扬通汉姚富柱涂源泉赵扬何跃 (云南昆明血液中心，云南昆明650106) 弓形虫(又称弓形体，toxoplasma 右，并呈逐年上升趋势。有报道弓形虫可经输血、器官移植传播[I]，弓形虫被卫生部列为可经输血传播的病 原体。如何尽可能避免输血感染弓形虫病是医疗卫生事业中的一项重大课题，为了解用EI。ISA及荧光定量 输血提供可靠的实验室依据。 1材料与方法 的献血者，所有献血者均采样3mr，用0．5蹦EDTA抗凝。 1。ab 药有限公司提供)；FQ-PCR试剂(中山大学达安基因股份有限公司提供)；MicroFAME自动酶免分析 Lab 仪；MicroSTAR自动加样仪；ABl7000荧光定量PCR仪。 1．3检测方法ELISA捕获法、FQ-PCR法严格按照各自说明书操作(具体过程略)。 1．4分析软件SPSS10．0统计分析软件，GeneBank网络数据库。 2结果 2．1 lgM、TDX-IgM阳性率的年龄、民族、职业、文化程度分布．见表l～4。 表1 弓型虫感染者的年龄分布 注：包括壮族、回族、傈傈族、拉枯族、景颇族、普米族和佤族 表3弓型虫态染者的职业分布 表4弓型虫态染者的文化程度分布 2．2 FQPCR结果每次试验的阳性对照结果良好，均能得到正常的S形曲线，并且都建立线性关系良好 测TOX—DNA结果均为阴性，随机选取的TOX—IgG及TOX 也为阴性。 3讨论 血清TOX 有随着年龄增高而上升的趋势，不同民族人群中弓形虫的感染率存在一定差别，但是没有统计学差异。不同 的人群中，弓形虫感染率随文化程度升高而降低，但没有统计学差异。血清流行病学调查表明，同一国家的 中国输血杂志2006年第19卷增刊(中国输血协会第目届输血大会) 不同地区TOX 地区无偿献『ff【者存在着不容忽视的弓形虫感染率。究其原因，可能是：①试剂敏感性差异；②环境卫生、个人 生活习惯：近年来，昆明地区由于家养宠物的兴起，密切接触动物使得养宠者感染弓形虫的可能性大大增加； ③特有的饮食习惯：过桥米线是云南人喜爱的一种特色饮食，部分少数民族有吃生肉的习俗感染；④人群免 疫状态差异：孕产妇与健康人的免疫状态的有着本质区别，因为受精卵着床的先决条件之一是妇女的免疫系 统要受到抑制，妊娠期是处于易受微生物侵袭的时期，Avellno等口“研究后发现妊娠妇女比对照组有2．2倍 的易受T0x感染的危险度，于是提出妊娠是易感TOX的一个重要危险因素。 FQPCR是直接检查标本中是否存在病原体的高灵敏、低污染核酸检测方法，只要待检标本中存在病原 检测出TOXDNA，其血制品就存在传染性，而感染弓形虫后出现弓形虫血症状态可能有几种时期：①初次 感染的急性期；②曾感染过弓形虫，体内可查出抗体等免疫学标志，免疫功能低下时，组织包囊内的缓殖子破 膜而出，转化为速殖子，全身播散导致严重的弓形虫脑炎、肺炎等临床表现，所形成再激活感染时期；③曾感 染过弓形虫，体内可查出抗体等免疫学标志，即使免疫功能完全正常，偶然的情况下，组织包囊可能由于某些 因素的作用释放出缓殖子，但迅速被机体的淋巴细胞、巨噬细胞吞噬，不产生任何表现，这种情况可能就是从 免疫功能正常的人体血液中分离出虫体的原因[12,13]，说明弓形虫感染人体后是一种带虫免疫状态一”““，即 使其抗体阳性的血液在一定条件下也是可能传播弓形虫的。 本次研究的实验全过程均在本中心输血研究室进行，该实验室按照分子生物学试验室设置标准进行了 严格的分区：试剂保存、核酸提取、核酸扩增、核酸检测等操作均是在不同的实验室里进行，并且全部试验步 骤均是由有经验的实验人员完成，作为内部阳性对照，对于抽提的大多数样品DNA在普通PCR仪 Bank序列比对完全吻合，消除了本次实验过程中假阴性的问题，从而完全可以排除因试剂、人的操作等因素 引起的误差。 至于卒组资料与国内有关报道‘”‘“1有明显差异的可能的原因是：①后者所选择的检测对象