荧光蛋白在枯草芽孢杆菌中的表达.pdfVIP

!墨璺丛!Q!!二!Q§4清华大学学报(自然科学版)2007年第47卷第6期 30／36 CN 874—877 11—2223／NJ Univ(sci＆Tech)，2007，V01．47，No．6 Tsinghua 荧光蛋白在枯草芽孢杆菌中的表达 刘敏胜，韩冰，邢新会 (清华大学化学工程系，北京100084) 摘要：枯草芽孢杆菌是生物工业用的重要宿主体系。为实 能实现分泌表达，为蛋白／酶的分离提供极大的便 现荧光蛋白从分子水平定量追踪枯草芽孢杆菌培养过程的 利[1]。近年来枯草芽孢杆菌作为外源基因表达的宿 目的，构建了一系列整合型表达载体pX—GFPmutl和游离 主系统发展迅速并展现出良好的工业应用前景比。6j， 型表达载体pSwl一GFPmutl，pSWl～cFP，pSwl一YFP，研 而枯草芽孢杆菌应用于工业生产、食品工业，饲料行 究了不同颜色荧光蛋白在枯草芽孢杆菌中整合型表达和游 业等生物过程时，需要建立快速定量追踪枯草芽孢 离型表达的差异。最适合的荧光蛋白表达体系是用游离型质 杆菌浓度和蛋白／酶浓度的方法。 粒pswl一GFPmutl在枯草芽孢杆菌中表达绿色荧光蛋白 fluorescent 绿色荧光蛋白(green protein， GFPmutl。含pswl一GFPmutl枯草芽孢杆菌通过木糖诱导 表达GFPmutl后，细胞破碎后的荧光强度和细胞浓度呈线 性关系。结果表明，利用枯草芽孢杆菌表达荧光蛋白可以实 的荧光蛋白口]。GFP广泛应用于报告蛋白、融合标 现利用荧光蛋白快速定量枯草芽孢杆菌培养过程。 记、生物传感器、pH检测传感器、蛋白间相互作用、 关键词：荧光蛋白；快速定量；枯草芽孢杆菌；生物过程 胞内各器官蛋白的传递等各领域∞o。近年来，由于 920 GFP蛋白检测简单、在宿主内表达负担小等优点， 中图分类号：TQ 文献标识码：A 文章编号：1000—0054(2007)06一0874一04 GFP作为一种新型的快速定量检测手段，引起生物 化工研究者的广泛关注。对于大肠杆菌宿主体系，已 有大量的荧光蛋白的表达和应用研究，而对于枯草 Offluorescentin Expression proteins 芽孢杆菌体系，虽然已有关于绿色荧光蛋白表达的 sH易ffZfs 曰ncf，Z比s 研究报道∽1，但面向生物过程应用的荧光蛋白的表 LlU Xinhui Minsheng，HANBing，XING 达方式的影响和不同颜色荧光蛋白的表达特性研究 ofChemical