分子印迹水解模拟酶MIP-3地研究.pdfVIP

!!竺±!墨 !璺些兰垒全曼墨±墨苎墅些茎兰苎三墨坚坌±些兰芏查塑堡鱼兰墨塑墨叁 墨塑 1 分子印迹水解模拟酶MP-3的研究 余建华‘黄启斌马德君 贾玉凤 邓云度 (中国人民解放军防化研究院第四所 北京 102205) 关键词 分子印进水解模拟群羧酸翻 合成催化水解动力学 允子印迹技术是一项为在高分子载体上获得空间结构和结台位点上与某一结构的化台 物或化台物的反应过渡态完全匹配的实验技术”’。将分子印迹技术用于模拟酶的研究，是人 们随着抗体酶研究的成功而发展起来的一项新技术，近年来众多的科学家在此领域里耕耘． 取得了可喜的成就”’”。用该方法台成模拟酶的最大特点是：既引用抗体酶通过底物过渡态 类似物获得催化体系的思路，又利用分子印迹技术实现在高分子基质上构筑识别、催化、结 合洞穴．由于其洞穴是按底物过渡态预留于高分子载体上，且功能基是与底物过渡态的活性 基团的位置匹配，因而底物分子在进入模拟酶孔穴后可以在孔内功能基的作用下使结构发生 形变，形成过渡态并与功能基结合，构成较为稳定的超分子，降低反应过渡态的肫量，催化 反应快速完成。本文主要报道我们进行分子印迹水解模拟酶系列研究之一：分子印迹水解模 拟酶MIP一3的合成和它对羧酸对硝基苯酿的催化反应的动力学研究。 。—乙一～ 1． 实验与结果 1．1分子印迹水解模拟酶MIP-3的合成 分子印迹水解模拟酶MIP一3的台成是我们参照文献3的合成方法．结合我们进行量子化学 计算结果，选用4一乙烯基-N-苯基一苯甲酰胺为功能基，甲基一对硝基苯基膦酸为模板分子， 2一甲基一丙烯酸甲酯、 二一甲基丙烯酸乙撑酯为交联剂，ZnO为纳米埋孔材料．在过渡金属离 子(Co”)存在下聚合合成的。其台成路线为： 一 n囊 遨弛塑坠． t9+静≮口。1L n^一 o国譬斧 ≥≮b铬分心、：：j制≥巍l‘怒 o §÷ 一 ∥， 熟．一～ ～未 子／ 1．2催化反应动力学的研究 催化反应动力学的研究，我们是根据文献的处理方法“’．在过量的模拟酶中．底物浓度 很低的情况下．通过测定不同时间内、不同酸度下(视缓冲体系中pH值几乎恒定)底物承 一353． 兰!!堕!旦 ±翼些兰全全望苎±鱼苎堡坐兰竺苎三墨塑坌±些兰兰查堕堡垒堡圭塑墨叁 壅塑 解后其水解体系的吸光度来完成的。故其动力学方程按一级动力学方程处理。催化反应的速 率常数通过表观速率常数kob。减去羧酸醑在相同pH值的相同缓冲体系中自发水解的速率常 数k…。来描述。整个1：作包括三方面的内容： a)水解产物——对硝基苯酚在不同p¨值的缓冲溶液中表观消光系数的测定 根据对水解体系各组分的uV光谱的分析，我H】确定400nm处为测定水解产物——对硝 基苯酚的吸收波长。在此条件下，我们测定了水解体系中羧酸对硝基苯醋的表观消光系数。 见Table l。 Tablel对硝基苯酚在不同pH值的缓冲溶液中4000m处吸收的裹观消光系数 l pH 7．O 7．5 80 9．0 l l gobs 8767 10985 l 3005 16891 l b)底物——羧酸对硝基苯酯自发水解速率常数的测定