蜂王浆超氧化物歧化酶分离纯化与部分性质研究.pdfVIP

全国第七届工业生化学术会议(2002．大连)论文集 研究论文摘要 质限制·PCBs主要以吸附态形式存在于土壤表面，在水相中的溶解度极低．PCBs分子从土壤 颗粒表面到细胞内部的传递速率是其生物降解的一个重要限制步骤：(2)生跃底物抑制PCBs 的共代谢转化．目前发现的PCBs的好氧生物降解均为共代谢过程．即降解菌不能利用PCBs 作为碳源，只能在代谢其相似底物时共代谢转化PCBs。目前，普遍采用向修复体系中添加其 相似物·联苯的方式，由于两种底物具有相同的酶降解位点．联苯的存在抑制PCBs的共代谢转 化。 为了解决以上问题，提高PCBs污染土壤的生物修复效率，我们提出了利用表面活性剂增 溶和生物降解耦合修复PCBs污染土壤的思想，即将提高PCBs的可生物利用性(传质速率) 和降低底物抑制作用二者有机结合。本文中．我们以2,3’．4．4，四氯联苯为研究对象，采用可被PCBs 作为四氯联苯的增溶剂和代谢能源，重点研究以非离子表面剂为唯一碳源的假单胞菌SM302是 否会产生共代谢降解PCBs的酶系。实验采用休眠细胞体系，降解菌为用以上两种表面活性剂 驯化5代的SM302，并与联苯作为唯一碳源的休眠细胞体系进行对照，降解对象为吸附在玻璃 瓶内表面的一定量的2,3’，4，4’四氯联苯。实验结果表明。经过72小时的保温降解，以联苯、 50％。这个结果说明，SM302以非离子表砸活性剂为碳源仍能产生共代谢降解PCBs的酶系， 用非离子表面活性剂取代联苯作为碳源是可行的。在此研究基础上，进一步考察了以上两种非 离子表面活性剂既作为脱附剂又作为碳源的活细胞体系对四氯联苯降解速率的影响。实验结果 100的活细胞体系对四氯联苯的降解率分别为33．1％和45．O％，远高于其相同情况下休眠细胞 体系的6，4*／d日27％，说明可生物利用的表面活性割的存在有助于四氯联苯的降解。 蜂王浆超氧化物歧化酶分离纯化及部分性质研究 闵丽娥 刘克武 刘晓雯 孟延发赵欣平 (四川大学生命科学学院，戍都610064) 对意大利工蜂及意大利工蜂蜂蛹、蜂王浆、蜂蜜、荞麦花粉和油菜花粉中SOD的分布进行 了研究，发现这几种蜂产品中都含有SoD活性，这些蜂产品SOD活力顺序为：蜂蛹蜂王浆 S-200分子筛层析。得到了纯化SOD．产率2．98％。纯化倍数104．43， 子交换纤维素和Seplmcryl 比活53．26 法为酶活力测定方法．发现该酶最适pH为8．3．研究了zn”、cu”、B矿、M矿、Mn2+等离子对 酶活力的影响。发现cu”、Ba“、M矿、Mn2+对SOD有不同程度的激活作用。其中，激活作用 5 堡塞堡壅苎曼 全鱼墨主星墨些兰些兰查室垫!!竺!查壅!堡塞塞 分钟后，酶仍然保留62％的酶活力，在70℃保温15分钟后仍有20％的酶活力。Cu”有提高酶热＼ 稳定性的作用。70℃保温15分钟后测得的酶活比25℃下所测酶活更高。酶种属鉴定发现该酶对 Atomic H102敏感-对乙醇和氯仿稳定．表明该酶为Cu／Zn-SOD。用220FS AbsorptionSpectromcter 测定了酶液中cu、zn、Fe、Mn的含量，发现该酶液中只含有cu、zn。经计算，每个亚基含1．6 察了BrAC和D1T对酶侧链修饰的情况，发现BrAC明显抑制酶活力，抑制程度与BrAC浓度 成正相关。Dr丌对酶活力的影响可以分为两个阶段．低浓度DTT抑制酶活力，而较高浓度DTT 则对酶有激活作用。脲的加入明显抑制酶活力。脲的浓度为2mol／L时，酶完全失去活力。 用UV-VIS TU．1800测定了酶的紫外光谱，发现该酶的最大紫外吸收在 spectrophometer 起酶的最大紫外吸收不断变大，最大吸收波长不断发生红移。在酶液中加入脲后，酶的最大紫外 吸收变大。但随着脲浓度的增大．紫外吸收变小。 用FL4500．fluorence 变化。BrAC和DT