一种新来源天然冰片对CHL细胞的细胞毒性与染色体畸变作用研究.pdfVIP

·第三届全同复方丹参滴丸学术会议论文集· 一种新来源天然冰片对CHL细胞的细胞毒性及染色体畸变作用研究 刘洋1胡利民1李怡岚2乔珊珊2杜嵘1范祥1张伯礼1 1天津中医学院3001932天津市卫生防病中心300011 摘要 应用MTT法检测不同浓度的天然冰片对中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞的细胞毒，胜，并应用染色体畸变试 验研究了天然冰片对cHL细胞的染色体畸变效应。发现MTT还原量、生成甲腈的光密度(OD)值与天然冰片之间 存在剂量关系，24h的50％细胞生长抑制浓度(IC50)为207．86ug·ml-1。染色体畸变试验剂量为200、100、50、 25、12．5(“g·m 5％；空白及溶剂对照组的染色体畸变率均在正常范围内；而阳性对照剂诱发的染色体细胞畸变率20％：各 剂量组与溶剂对照组比较差异无显著性，P0．05。结果表明：天然冰片无诱发CHL细胞染色体畸变作用。 关键词天然冰片：细胞毒性；染色体畸变；中国仓鼠肺成纤维细胞 冰片，古称龙脑香，味辛苦微寒，归心，脾， 液配制，浓度lmg-ml一1；HEPES，天津市联星生 肺经，有开窍醒神，清热止痛，消肿生肌之功。在 物科技有限责任公司产品。 临床上尤其是心血管、脑病的治疗方面应用极为广 泛，是常见的芳香开窍药。 1．1．4细胞培养液(／L) 冰片按来源不同可分为天然冰片和合成冰片 两大类。天然冰片属正龙脑，按旋光不同又可分为 右旋龙脑(梅片)和左旋龙脑(艾片)。而合成冰片是 公司生产)，胎牛血清100ml(天津灏洋生物制品有 没有旋光的消旋体，主要由龙脑和异龙脑组成。由 限责任公司)，青霉素100000单位，链霉素100000单 于我国天然冰片(尤其是右旋龙脑)极少，故目前的 位，NaHC022．0克，去离子水定容，过滤除茵，4 中成药市场上几乎全部是用合成冰片替代天然冰 ℃贮存备用。 片【1】o近年，在湖南、江西等地发现从樟属植物中 可提取纯度97％以上的右旋龙脑，为我国增添了一 1．1．5 S9代谢活化系统 种新的天然冰片药物资源[2|。为了证实这种新来源 肝脏微粒体酶(S9)的制备依照Ames法【3】。由多 天然冰片对细胞染色体有无损伤作用，本文应用 氯联苯(Aroclor 1524)腹腔注射诱导2009左右的性成 MTT法和染色体畸变分析法研究了天然冰片对 熟SD雄性大鼠，于腹腔注射后第5d在0-4C无菌 CHL细胞的细胞毒性及染色体畸变效应，报道如 条件下制备肝匀浆，-80。C储藏。试验前新鲜配制 下。 s9代谢活化系统(S9mix)，细胞染色体畸变试验的 活化实验部分所需的s9mix(以总体积10ml计)包括 1材料与方法 以下成分【4】： 1．1材料 S9 3ml 1．1．1受试物 20mmol-L一1 2ml HEPES缓冲液 天然冰片由天津天士力制药股份有限公司提 50mmol·L_1 lml