Goldview标记的DNA荧光毛细生物传感器的研究.pdfVIP

第29卷，第1期 光谱学与光谱分析 V01．29。No．1，ppl65—168 200 and 9年1月 SpectroscopySpectral Analysis January，2009 Goldview标记的DNA荧光毛细生物传感器的研究 王艳君1，李永生弘，杨全玉1，黄羰1，唐 静1，高秀峰n l。嚣j||大学华嚣麓醚箧学与法嚣学院，l基I／I|残都610041 2．凹J|f大学化学工程学院，四川成都610065 籀要对Goldview(GV)作为荧先标记物的DNA荧光毛缨生物传感器进行了掰宠。以荧光毛细分掇法 (fluorescence capillary fluorescence 制成DNA荧光毛细生物传感器(DNA capillary DNA杂突，通过GV染色后，稔测杂交产物的荧光强度，实现对靶测A的定性和定量分析。样品用墩12 taL，靶DNA酶浓度在0．4～4tanol·L。(2．4～24nag·L1)范黧痰秘荧光强度有良好黪线性关系(岁一 65．911x+3．994 4，r一0．9989)；RSD3．5％，检出限0．39 gmol·I．叫(2．2mg·L叫)，能达到定量检测靶 DNA的翻的。用DNA-FCB测定靶DNA操作简便，试样、试剂用量少，测定成本极低，能大大减少环境污 染。 关键词DNA；荧光范细生物传感器；Goldview 串固分类号：(M33．1文献标识码：A 诱变剂，可以致癌，使用中会导致寅验仪器和环境的污染， 引 言 不利于环保。废弃的EB染液必须进行特殊地净化处理，给 戮究工终豢来诸多不便。G够珏j是一种近秀霉援毽翦囊型核 核酸是生命遗传信息的载体，对核酸序列的结构分析和 酸染料，灵敏度与EB栩警，而且不舆致癌性。GV染色在紫 测定搬生命科学中具有重大的意义。目前核酸的检测方法主 外光源照射下与dsDNA结合，呈现绿色荧光，简与ssDNA 要有DNA传感器翔DNA芯|跨薅种。DNA芯片[1_】舆有高 缀合，里红色荧光，笼较好地区分dsDNA与ssDNA。本研 密度的特性，可同时进行上万个基因的检测，在功能基因维 究选用GV作为DNA标记物对DNA荧光毛缬生物传感器 的研究中有非常霞要的应用价值。但是，由于它的制作成本 进行了考察。 高，仪器设备昂贵目前很难普及应用。近年来，有关DNA传 感器瓣研究较多，它具有成本低、省器重、襟作蔫蕈、瑟敏度 1实验部分 高、既可定性又可定量的优点，已经成为一个新的研究热 点。DNA生物传感器根据选用的介质及换能器不同可分为 1．1仪器和试剂 毫纯学[。“】、歪毫鑫捧强]稳毙学簧感器mI等多耪。童予光学 l。l。l鼓器和试裁 技术的成熟性，在DNA传感器的研究中，光学传感器一直 是首选对象。我们基于荧光筏细分析法[1州2]对脱氧核糖核酸 遂行了溺定，在研究孛采震鹩是Cy-5靶DNA末端探滋，褥 到了满意的结果。但是，Cy-5DNA末端标记成本较离，也不 适合实际样品的逝接测定。因此，考虑使用双链DNA嵌入 学试剂六厂；毛细管(巍径1．1nm)为四川I大学华西医科大 型荧光染料，在DNA探针秘靶DNA杂交形成双链聪，进行 ACCTGTr豫丁rG 学仪器厂产鼹；DNA探针：5’一GAA