d-生物素有关物质的HPLC测定.pdfVIP

技术篇 d一生物素有关物质的HPLC汉IJ定 陈建辉L2潘一斌2陈斌3 (1南京工业大学制药与生命科学学院，江苏南京，210009； 2浙江医药股份有限公司新昌制药厂，浙江新昌，312500； 3绍兴文理学院化学4t5．r-学院，浙江绍兴，312000) 摘要：建立了HPLc法测定d一生物素的有关物质．采用c。。柱，流动相为0．05％三氟乙酸水溶液一乙腈 (75：25)，检测波长：210nm．d-生物素与有关物质达基线分离． 关键词：d一生物素；有关物质；高效液相色谱；测定 d一生物紊(d—Biotin，1)又称维生紊H，辅酶R，它是 一种以游离或与蛋白质结合的形式广泛分布于动植物组织 ⅢPu刚TIR¨-=N去 中，生物素已广泛应用于医药、家禽、家畜的饲料添加 剂方面。有关1的分析方法的研究也取得了较快的进展。 ‘‘一，，‘、、，，，、r—B·R，，4飞?2” 1的合成路线长。其合成方法可能引入比较多的有关物质 (impurityA．B，C，D，E，F，G，H)(图1)，目前比较权威的分析 c叱×～ o． R／＼／、衫∞，” 方法是欧洲药典，其在美国药典的滴定法含量测定的基础 、8—、—一^、—，、COOH H CHI 上提出有关物质的TLC控制方法，本文建立HPLC法测定1 的有关物质，方法专属性强，结果准确。 1仪器与试药 E·‘～。￡：：：；；；jf￡。。，。 高效液相色谱仪(Agilent1100)，日本岛津UV2201型紫 外分光光度计，浙江大学N2010系列色谱数据工作站。 生物紊3批样品20080902 F．～趴…。一如 均由浙江医药股份有限公司新昌制药厂提供；水为重蒸馏 一、 且 。 。，、 水．杂质A～H均自制；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析 图1 1的有关物质的结构式 纯。 2方法与结果 2．2溶液配制 供试品溶液：精密称取1适量，用流动相溶解并稀 2．1 色谱条件 释．制成含11．0mg／ml的供试品溶液。 色谱柱：MG—C18柱(250mm×4．6mm，s斗m)；流 对照液：精密量取供试品溶液lml，置100ml量瓶中。 动相：o．05％氟乙酸水溶液一乙腈(75：25)；流速：I．0 加流动相定容待用。 ml／min；检测波长：210rim；进样量10斗1。 有关物质溶液：分别精密称取有关物质A—H适量． 113 论文集 用流动相溶解并稀释成各组丹f11m∥n“的溶液。 溶液在“h内稳定 混合溶液：丹别牺密称取l及有关物质A—H适量．用 28有关物质测定 流动相溶解并稀释．制威各蛆分nhng／mI的混合