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2017-08-17 发布于江西
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利用微滴数字PCR分析转基因生物外源基因拷贝数.pdf

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利用微滴数字PCR分析转基因生物外源基因拷贝数.pdf

，7 j煮赫。!：《囊夔垒囊拄醺攀曩 OnI-ne ／ svstem：hnp：／^^n^n^，．iabiotech．orq 煮豫_蠢翮枷…磕篆釜爹no．唧．婴理利用微滴数字PCR分析转基因生物外源基因拷贝数姜羽胡佳莹杨立桃’ 上海交通大学生命科学技术学院，上海200240 +通讯作者，yylltc@sjtu．edu．cn 摘要微滴数字PCR(dropletd蜮talPCR，ddPCR)是一种基于泊松分布原理的核酸分子绝对定量技术，在核酸分子的绝对计数／定量领域具有极大的应用潜力。本研究基于ddPCR平台，以转基因水稻(D懈 modmed real—time blot方法的准确性。实验数据表明，T1c一19的杀虫晶体 (quantitativePCR，qRT-PCR)和Southem 蛋白基因(insecticidalcrystal 报道的Southem 1．51拷贝。转人乳铁蛋白基因(human 致，均测得含有l拷贝的HLF基因。研究结果表明，微滴数字PCR方法是一种经济、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法，灵敏度和准确性高，将会在拷贝数分析中广泛应用。关键词微滴数字PCR(ddPCR)，转基因生物(GMOs)，外源基因，拷贝数 the Genes Numberof EstimatingExogenousCopy Modified PCR OrganismsbyDropletDigital Y_uHU YANGLi—Tao+ JIANG Jia-Ying schoolofLifescienceand Jiao 200240，china T0nguniVers咄shan曲ai Techn0109y’shan曲ai 4Con℃spondingauthor，yylltt(孕sjtu．edu．cn Abstract isanew methodbasedonPoisson PCR(ddPCR)absolutelyquantitatiVe Dropletdigital shows inaccurate ofnucleic quantificationacid．Herein，we distribution，whichhugepotential印plicability in modified e【dPCRmethodtoevaluatethe number the developed exogenousgenecopy geneticallyo昭anisms the modified 1c一19and humanlactofeHin (GM0s)asexample仔omgeneticallyrice(D彬os口f溉)T transgenic 34 theresultswasalso withthosef．rom Real一 examples，and