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微生物多糖的研究进展 　　【摘要】微生物多糖是对微生物有保护作用的生物高聚物，它是由细菌、真菌、蓝藻等微生物在代谢过程中产生的。它以其安全、无毒、理化性质独特等优良特性，被广泛应用于工业生产中，具有较强的市场竞争力和广阔的发展前景。 　　【关键词】微生物多糖 优良特性 功效前景 　　微生物多糖是细菌、真菌、蓝藻等微生物在代谢过程中产生的对微生物有保护作用的生物高聚物。微生物多糖在工业生产与生活的许多领域具有广泛的应用价值，如作为微生物絮凝剂、微生物采油中的生物化学调剖剂、食品添加剂、保鲜剂、抗癌医药品、包装材料等。微生物多糖生产周期短，不受气候和地理环境条件的限制，可以在人工控制条件下利用各种废渣、废液进行生产。另外，由于潜在用途不断被开发，应用前景比动植物多糖更为广阔。当前只有很少种类的多糖及产生菌用于工农业生产，因此有必要筛选、分离新的微生物多糖产生菌，并对多糖的化学结构、生物合成调控基因及代谢途径进行深入研究。 　　第一章 微生物多糖的种类和性质 　　多近年来，研究者借助各种技术和手段对多种微生物多糖的分离、组成和结构进行了深入研究。实验室生产微生物多糖的培养基一般为高糖培养基，工业生产多采用淀粉发酵或利用糖厂废糖蜜为原料。微生物多糖的发酵液较粘稠，收获时一般加入蒸馏水降低粘度，再透析除盐，离心去除菌体与杂质，加入有机溶剂沉淀多糖，得到多糖粗品。有机溶剂多用丙酮、乙醇、异丙醇、氯化十六烷基吡啶(CPC)等。多糖粗品可以通过阴离子或阳离子柱层析纯化，并据以判断多糖所带电荷的种类。层析产品经冷冻干燥即得到多糖精品。将多糖精品进行凝胶过滤层析可以判定分子量范围，通过元素分析可以检测C、H、O、N、S、P等元素含量，通过红外光谱测定可以确定键型与特征官能团，从而确定多糖的类型。将多糖水解后进行高效液相色谱分析，可以确定多糖中单糖组分的类型及所占比例，通过红外、色质联用与核磁共振进行精确分析可以确定多糖分子结构。 　　第二章 营养物对微生物多糖合成的影响 　　在微生物多糖合成过程中，营养物的主要影响因素是培养基中的C源与N源，微量元素及金属离子也有一定促进作用。在实验室中多糖发酵培养基多以葡萄糖、蔗糖、淀粉(试剂级)等为原料，费用较高。刘月英[1]在研究斯达油酯酵母U9018生产胞外多糖的适宜条件时，分别以葡萄糖、蔗糖、可溶淀粉、地瓜淀粉、玉米淀粉为C源进行选择，结果表明以10%蔗糖为C源，0.3%蛋白胨为N源，辅以一定量KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、MnSO4、FeSO4，25℃振荡培养6天后，多糖产量可以达到23.2g/L；通过三因素正交实验，确定对多糖产量的影响大小排序是C源P源N源，对多糖转化率的影响大小排序是P源C源N源。 　　在工业生产中如果能以含糖质较丰富的玉米糖浆、糖厂废糖蜜、酿酒厂酒糟、造纸厂废液为发酵培养基原料，不仅能降低生产成本，而且能够解决一些含糖有机物的环境污染问题。林志勇[2]等在周毛德克氏菌生产胞外多糖过程研究中，用甘露醇作为对照，以玉米糖、麦芽汁、糖蜜、酒糟等为C源，分别以NaNO3、NH4Cl、(NH4)2SO4、蛋白胨、鱼粉、玉米浆、黄豆粉为N源，研究了营养物对微生物多糖产量的影响，表明选用玉米糖和玉米浆作为C源与N源，多糖产量可以达到19.35g/L，C源利用率为82.4%。 　　使用自来水配制培养基时，微生物多糖的产量比使用蒸馏水或去离子水时要高，这是由于自来水中的无机盐类对多糖的产生起促进作用。影响多糖产生的无机离子主要有SO2-4、Ca2+、Mg2+、Mn2+和Fe3+等，这些离子可能被用于底物吸收或者作为多糖合成过程的辅助因子。多糖发酵培养基最好用自来水配制，并辅以一定量的无机盐。 　　第三章 微生物多糖生物合成途径 　　微生物多糖种类繁多，但都是由不同的单糖或其他基团在特定的酶催化下聚合而成的。微生物多糖的生物合成常因菌种不同而发生在不同的生长阶段，按合成位点和合成模式的不同可分为两种类型:同型多糖的合成与异型多糖的合成。异型多糖如黄原胶、结冷胶等的合成是在细胞内进行的，比同型多糖的合成复杂。异型多糖的合成体系包含5个因子，即糖基核苷酸、酰基供体、脂中间体、酶系统及糖基受体。 　　在野油菜黄单胞菌生物合成黄原胶过程中[3]，首先是吸收甘露糖(或其他己糖)，合成糖核苷酸前体、磷酸烯醇丙酮酸与乙酰辅酶A，再形成连接有类脂的糖中间体，最后聚合成高分子多糖，从细胞中释放出来。其中，戊糖亚基是最先合成的，它按以下顺序形成各种前体:UDP2葡萄糖、GDP2甘露糖、UDP2葡萄糖醛酸、乙酰辅酶A、磷酸烯醇丙酮酸，最后连接到脂载体(异戊二烯二磷酸)上。在此聚合物合成过程中需要8种酶:5种特殊转移酶，1种乙酰化酶，1种缩酮转移酶，1种聚合酶。此合成过程在含高糖氮比的培养基中可以将70%