同种异体神经移植研究中降低免疫排斥反应的进展_临床医学论文.docVIP

同种异体神经移植研究中降低免疫排斥反应的进展_临床医学论文 同种异体神经移植研究中降低免疫排斥反应的进展_临床医学论文 作者：孔凡宾 陈克明，刘兴炎 【关键词】 神经缺损 周围神经缺损，无论在平时或战时，都十分常见。缺损后，临床上首选自体神经移植，但自体神经来源有限，并给供区造成一定的功能障碍。目前，解决神经缺损的研究主要集中在两个方面：一方面是研究采用肌桥、静脉管、硅胶管、组织工程等替代物，前三种的结果都不如人意，而后者尚处于实验阶段；另一方面是研究同种异体神经移植，它不但具有其它替代材料所没有的网管状神经内部结构，利于神经的再生，而且来源广泛，可以得到与缺损神经长短相似的移植物，但存在免疫排斥问题。国内外许多学者已对异体神经移植的免疫排斥反应进行了深入的研究，取得了良好的进展，预示着异体神经移植有着广阔的应用前景，本文对此做一综述。 1 移植物预处理 1.1 冷冻处理法 对供体神经加以单纯冷冻或反复深冻、复融处理，使雪旺细胞(schwann cell，SC)活性降低或灭活，又不损伤为轴突再生提供机械支架和通道的基膜管，利于轴突再生。王秋根等［1］将大鼠的供体神经按不同温度(-196℃、-80℃、-40℃)和不同保存时间(20 min、1、3周)进行冷冻，室温下复温，然后再冷冻、再复温，共反复5次。进行同种异体移植后发现，神经断端再生轴突能通过并长入远断端，并认为冷冻温度以-196℃为好，保存时间以3周为佳。而Fansa等［2］实验发现-196℃保存的同种异体神经移植1周后，超微结构有类似华勒变性现象发生；术后1个月神经退变结束，同时有神经纤维再生并伴移植物神经化；术后6个月神经化最明显。陈红等［3］报道先在-50℃的二甲基亚砜中保存40 min再放入-196℃的深低温中保存，效果较直接深低温保存好。不过最近Fox等［4］实验证实，对异体神经分别冷存1、4、7周，时间越长，细胞免疫反应越轻，保存7周的神经免疫反应接近缺失。冷存时间的延长不影响神经的再生。总之，冷冻的最佳保存温度和时间等问题还需进一步研究。大多数学者认为冷冻处理法不能清除细胞崩解产物，组织相容性抗原复合物仍然存在，移植效果比自体移植效果差。 1.2 生物学方法 郑桂芬等［5］用受体犬血浆浸泡异体犬正中神经15～20 min后，再用液氮保存21 d，与仅用-196℃保存21 d的异体犬正中神经相比较，发现前者移植后结缔组织增生较轻而再生神经纤维数量较多。认为该方法能减轻免疫反应引起的结缔组织增生、减少胶原原纤维的形成，有利于SC形成Büngner带，从而促进神经再生。最近，赵波等［6］发现异体神经皮下包埋后有促进周围神经再生的作用，并认为包埋最佳时间可能出现在1、2周之间，但具体时间还需进一步的实验研究。 1.3 放射辐照法 李建兵等［7］报道放射辐照能够降低异体神经的抗原性，其作用机理可能是X线杀死SC，破坏了其继续分泌抗生素原物质的功能，并通过保留的神经膜管结构支架使周围神经得以再生。李天侠等［8］则进一步发现低温加紫外线B照射可以充分降低异体神经的免疫原性，是具有应用前景的预处理方法。 1.4 化学去细胞法 近几年发展起来的化学去细胞法，可有效清除神经中的细胞及髓鞘，为寻找理想的自体神经移植替代物开辟了新的途径。1997年Dument等［9］应用溶血性磷脂胆碱等化学消化剂，对鼠15 mm长的坐骨神经进行化学处理，获得了鼠的去细胞坐骨神经。1998年Sondell等［10］用三硝基甲苯X-100 (TritonX-100)和脱氧胆酸钠等对异体神经进行去细胞处理后，观察到SC、髓鞘及轴突被完全清除，并保留了完整的基膜管结构，从而达到了“化学抽吸”的目的，有利于宿主SC及轴突等沿着空的基膜管向远端迁移和生长。在上述学者的研究基础上，戴传昌等［11］将异体预变性神经和正常神经用溶血性卵磷脂裂解液处理后，用于缺损神经的移植，取得了良好的效果，并认为经预变性处理的效果更好。刘承吉等［12］用Triton X-100等试剂，采用低渗—去细胞组织工程学方法处理大鼠坐骨神经，成功地制备了去细胞异体神经移植物。 上述化学去细胞法仅用在小动物及低等哺乳动物实验中，移植长度也很有限。衷鸿宾等［13］应用Triton X-100和脱氧胆酸钠溶液对犬异体神经进行去细胞处理，成功建立了大型哺乳动物(犬)的粗大和长段去细胞神经的化学萃取方法。他们［14］采用真空封装辐照灭菌法深低温储存犬去细胞坐骨神经1年后，发现仍然保持为无细胞、髓鞘及其碎片的空的神经基膜管。此储存方法为去细胞神经移植物向成品化方向发展奠定了基础。郭义柱等［15］用Triton X-100和脱氧胆酸钠溶液，将正常健康捐献者的周围神经进行去细胞处理后，对11例神经缺损的患者进行移植，术后观察效果较满意，