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第三章 细胞生物学研究方法 细胞形态结构的观察方法 细胞组分的分析方法 细胞培养、细胞工程 与显微操作技术 3.植物细胞培养 二、细胞工程 1.细胞融合（cell fusion）与细胞杂交（cell hybridization） 3.细胞拆合与显微操作技术micromanipulation technique 对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈 第四节 用于细胞生物学研究的模式生物 模式生物是生命科学研究的重要材料，为生命科学的发展做出了重要的贡献。模式生物的结构简单、生活史短、人工繁育便利、基因组小、基因组成少等特点, 可以为科学研究提供一种便利的工具, 同时也可以为人类基因组计划方面的工作提供理想的实验系统, 并发展新的基因组研究技术。 一、病毒：基因组小，简单，适于遗传分析和自组装机制研究 二、细菌：基因组小，适合做遗传分析 三、酵母：单细胞，生长周期简单，生长迅速，世代时间短，可以在平板上形成单克隆，也能进行液体培养，以单倍体与二倍体2种形式生长，能对其配子的发育过程进行分子分析，易于遗传操作。 四、线虫：细胞数少且恒定，用于细胞分化发育研究 线虫通身透明，观察十分容易。更为重要的一点是，它是惟一一个身体中的所有细胞能被逐个盘点并各归其类的生物。在理想的条件下生命周期大约为3d。成体长约1-1.5mm，身体直径约70um。蠕虫状的、两侧对称、体表有一层角质层覆盖物，无分节有四条主要的表皮索状组织及一個充满体液的假体腔。2002年诺贝尔生理学或医学奖，“程序性细胞死亡”理论就是以线虫为实验对象而得出的。2006年的诺贝尔生理医学奖，“RNA干扰现象”也正是建立在对线虫的研究基础上获得的。因此，线虫那独特的特征让它成为了超级模式生物，而且目前似乎没有更好的生物模式能取代其在实验室研究领域的第一地位。 秀丽小杆线虫是一种常见的、自由生活的小型土壤线虫，在世界的许多地方都有分布，属于小杆亚纲小杆目小杆总科以细菌为食，由于标本很便宜、在实验室条件下容易生长，被用做为典范生物。在研究细胞分化方面特別有贡献，而且是第一個基因组完全被定序的多細胞生物。其基因组序列大约有1×105个碱基对，內含一万九千个以上的基因。 它有两种性形式：一种雌雄同体和一种雄虫，其成体的外部形态是有区别的。雌雄同体既产生卵，又产生精子，可以自体授精进行繁殖。雄体以很低的频率自发产生，可以与雌雄同体交配，但雌雄同体相互之间不能进行授精。一条未经交配的雌雄同体在它的生殖期中可以产生大约300个受精卵。幼虫孵化和发育经过4个幼虫阶段，其间由蜕皮所间断。第四次蜕皮后的成熟成体繁殖大约4d，然后再继续生活10-15d。 通常在20 0C下，在小的琼脂平板上或在溶液中培养。用无细胞的消毒培养基也可以，但生长速率要慢很多。 五、果蝇：染色体特性、胚胎发育的基因调控机制 模式生物中最熟知的物种之一是果蝇。三大遗传定律之一的“基因的连锁和互换定律”就是建立在果蝇研究的基础上的；染色体的鉴别与分析的典型材料也取自于果蝇幼虫的唾液腺细胞中的染色体；3次诺贝尔生理学或医学奖的研究材料也正是果蝇(1933年摩尔根，1946年缪勒，1995年刘易斯、尼尔森·沃哈德和维斯郝斯)。 作为模式生物，果蝇具有以下几个方面的优点：①个体小，易培养；②繁殖能力强，生命周期短，一般12 d就可完成世代交替；③性状易于识别，十分有利于遗传分析；④有大量的突变体；⑤基因组小，只有4对染色体，且幼虫唾液腺细胞中染色体巨大，可十分方便地进行染色体鉴别与分析；⑥胚胎发育速度快，其胚胎发育过程是观察分析卵裂、早期胚胎发生和躯体模式形成等发育调控机制的绝佳材料。 　　基于清晰的遗传背景和便捷的遗传操作，果蝇在发育生物学、生物化学、分子生物学等领域也都占据了不可替代的位置。果蝇在近一个世纪以来的生物学舞台上占有举足轻重的地位，在各个领域的广泛应用使其成为一种理想的模式生物，为人类探索生命科学的真谛做出不可磨灭的贡献。  六、斑马鱼：身体几乎透明，可快速寻找调控发育和组织发生的基因。 斑马鱼——模式动物的新星 自20 世纪90年代初以来，斑马鱼因其多方面的优点已成为模式动物家族中重要的一员，受到越来越多的重视和利用。 目前，斑马鱼被广泛地用于发育生物学、遗传学、免疫学、内分泌学等方面的研究，不断涌现新的研究成果。近年来随着对该生物免疫系统的深入研究，人们发现其存在着较为完整的特异性免疫系统并且具备血液系统发育过程透明、对特异性免疫系统依赖性低等特点,从而使这种新型模式生物在免疫学研究中的应用也开始为