一株海绵共附生真菌Pleosporaceaesp.中甾体类化合物及其生物活性.pdfVIP

第41卷第1z期 中国海洋大学学报 4“12)：081～085 2011年12月 PERIODICALOFOCEANUNIVERSITYoFCHINA De已．2011 一株海绵共附生真菌Pleosporaceaesp．中 甾体类化合物及其生物活性’ 赵琨1，孙雪萍1，韩磊1，郑彩娟1，陈敏1，邵长伦1，佘志月02，王长云1聃 (1．中国海洋大学医药学院，海洋药物教育部重点实验室。山东青岛Z66003；2．中山大学化学与化学-i-程学院，广东广州510275) 摘要： 在生物活性测定指导下，综合运用硅胶柱层析、凝胶柱层析以及半制备HPLC等方法，从南海海绵Xestospongia testudinaria来源的一株共附牛真菌Pleosporaceaesp．发酵液的乙酸乙酯提取物中分离鉴定出5个甾体类化物，通过NMR， temia salina致死活性，化合物1还显示强的抗藤壶Balanusamphitrite附着活性，其E珐。为0．85t．,g／me。 关键词： 海绵共附生真菌；次级代谢产物；甾体；生物活性 中图法分类号：R931．711 文献标志码：A 文章编号： 1672—5174(2011)12—081—05 海绵共附生微生物蕴含着许多结构新颖的次级代 细胞HI。60和肺癌细胞A549；抗生物附着活性采用藤 壶Balanus 谢产物，主要包括大环内酯类[1]、聚酮类L2]、环肽类Es]、 生物碱类[43等，这些化合物往往具有强的抗菌、抗肿瘤 (天津四友生物医学公司)。 等药理活性，近年来已成为海洋天然产物研究的热点 1．2菌株的分离与培养 之一。海绵来源的微生物主要是真菌和细菌[5]，尤以 1．2．1菌株来源 真菌中次级代谢产物种类繁多、活性独特而备受重视。 中分离获得一株海绵共附生真菌，其发酵液的乙酸乙 testudi— 本研究从采自中国南海的海绵Xestospongia酯提取物对卤虫具有较强的致死活性。结合形态、生 naria中分离获得一株链格孢菌Pleosporaceaesp．，其 accessionnumber 理生化特征及分子鉴定(GenBank 发酵液的乙酸乙酯提取物对卤虫Artemiasalina显示 强的致死活性，对其次级代谢产物进行活性追踪分离， sp．。菌株保藏在中国海洋大学海洋药物教育部重点 获得5个甾体类化合物，均为首次从Pleosporaceae属 真菌中分离获得。对所得化合物的卤虫致死活性、细 基，4℃保存。 胞毒活性和防生物附着活性进行了测定。 1．2．2发酵与提取 经发酵条件考察确定真菌发酵 条件为：静置培养，土豆汁液体培养基(PDA液体培养 1材料与方法 基)，发酵温度28℃，发酵时间28d。保藏菌株经复苏 1．1试剂和仪器 后，从斜面转接到装有i00mL土豆汁液体培养基的三 角瓶(500 h，获得种子培 核磁共振波谱仪JEoLEclips-600(日本电子)；质 mL)中，在28℃静置培养48 mL土豆 UltimaGlobal 养液。取种子培养液5mL加入到装有300 谱仪ESI-MSQ-T()F GAA076(美国