发光酶基因(luxAB)标记的荧光假单胞菌CP1108的定殖能力研究.pdfVIP

中国土壤与肥料2011(6) 发光酶基因(1uxAB)标记的荧光假 单胞菌CPl108的定殖能力研究 魏永涛，唐欣昀。 (安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230036) 研究标记菌株CPll08L的个体生态学特征及其在棉花根圈的定殖动态。结果表明，标记菌株连续传代20次均未 发生质粒丢失现象，标记质粒在受体菌株中较为稳定，CPll08L菌株的生长及部分生理生化特性没有受到标记质 粒的影响；标记菌株能够在棉花根圈中成功定殖，棉花生长14d时，CPI108L在所有深度的根段均达到最高定殖 水平，定殖密度分别为2．31×105cfu·g“根土、3．18×105 cm根段处标记菌株的定 cfu·g“鲜根，而其中以0～2 殖密度最大，根际和根表的菌数分别为9．08×104 cfu·g’1根土、1．44×105cfu-g。1鲜根；接种CPll08和 CPI 108L菌液处理棉花植株的干重、主根长和株高显著高于对照组；两个菌株处理之间差异不显著。 关键词：解磷微生物；荧光假单胞菌；IuxAB基因；三亲本杂交；盆栽试验 中图分类号：s939．11+2文献标识码：A 文章编号：1673—6257(2011)06一0072一04 108 土壤中存在大量的微生物，能够将植物难以吸 混合培养时为优势菌株帕’7】。但是目前对CPl 收利用的磷转化为可吸收利用的形态，具有这种能 在土壤或作物根际的定殖、存活、繁殖等微生态行 力的微生物称为解磷菌或溶磷菌(Phosphate—solu．为规律及其解磷机制仍缺乏深入系统的研究。本实 microorganisms，PSM)¨J。解磷微生物的研验利用luxAB标记技术，研究标记菌株在土壤中的 bilizing 究已从筛选、鉴定、田间效果实验向大田应用、解 定殖动态，并对标记菌株与出发菌株的部分生理生 磷机制和解磷微生物的基因工程改良研究阶段转 化特性、生长动态和对棉花的促生作用等进行比 变，其中基因工程技术为解磷微生物的研究和应用 较，以期为微生物肥料功能菌的根际微生态学研究 带来了新的希望，但是关于根际微域生理生态学研 提供合适材料和理论依据。 究相对不足¨J。 1 材料与方法 近年来，基因标记技术的发展和成熟为植物根 1．1 rhizobactefia。 材料 际促生菌(plantgrowth—promodng 1．1．1 供试菌株 PGPR)菌株和微生物肥料菌株的微生态学研究提 受体菌为解磷菌CPl 供了有效手段，便于对PGPR菌株在植物根圈的定 108[6’7】，经16SrDNA序 殖动态和扩散规律进行研究[3’引。与传统的检测技 术相比，luxAB基因标记技术具有灵敏、精确等特cells)。供体菌和辅助菌分别为大肠杆菌最coli 点，可以原位追踪释放的菌株在土壤中的定殖动 coli 态J。荧光假单胞菌(Pseudomonas．∥∞册ce瑚) CPll08是自棉花根圈分离的一株解磷细菌，对棉 大学何琳燕惠赠。 花生长有明显的促生长作