高速逆流色谱与硅胶柱层析联用分离岩黄连中的2种原小檗碱型季胺生物碱.pdfVIP

第31卷第1期 分析试验室 VoL31．No．1 Chinese of 2012—1 2012年1月 Journal AnalysisLaboratory 高速逆流色谱与硅胶柱层析联用分离岩黄连中的 2种原小檗碱型季胺生物碱 梁镇然1，蔡锐燕1，蒋林1，赵志敏1，杨得坡1，一，朱龙平1’2，王冬梅“ (1．中山大学药学院天然药物与中药研究所，广州510006； 2．广东省现代中药工程技术研究开发中心，广州510006) 摘要：建立了分离岩黄连2种生物碱的方法。岩黄连醇提物经溶剂萃取后的 水相提取物，经过硅胶柱层析粗分离，对其中一个流分采用高速逆流色谱法，以 正己烷．乙酸乙酯一正丁醇．乙醇．水．氨水(体积比为0．4：1．5：4：0．4：5：0．11)为两 相溶剂系统，下相为固定相，上相为流动相，通过一次高速逆流色谱，即可从 64．81 rIlg纯度为97．0％的去氢碎叶紫堇碱 mg样品中分离得到9．28 (dehydrocheilanthifoline)和4．38mg纯度为90．7％的脱氢异阿朴卡维汀 测定分子量，确认了化合物的结构。该方法降低了反复的柱层析导致的样品损 失，也为上述两种化合物的药理研究提供了物质基础。 关键词：高速逆流色谱；岩黄连；生物碱 中图分类号：0657．7文献标识码：A 文章编号：1000—0720(2012)01．98—04 高速逆流色谱(HSCCC)由于使用普通溶剂而 岩黄连，系罂粟科(Papaveraceae)紫堇属多年 saxicola 不是固相载体作为固定相，可以最大限度地避免因 生草本植物石生黄堇CorydalisBunting的 全草【1J，其主要有效成分为生物碱嵋1，民间多用于 固相载体的不可逆吸附所导致的损失、污染、失活 治疗肝炎、肝硬化、肝癌等疾病旧．4J。 变性等问题，提高分离效率¨J。有文献报道 目前分离岩黄连生物碱的方法，最常用的是反 HSCCC用于分离岩黄连中的脱氢卡维汀哺J，但用 复的硅胶柱层析，ShephadexLH-20、C．。反相硅胶、于岩黄连系统分离则未见报道。 MCICHP-20P柱层析也有使用口j’6』。岩黄连本文将硅胶柱层析和HSCCC的特点相结合， gel 醇提取物经不同极性有机溶剂分步萃取后，余下的 先用硅胶柱层析对岩黄连水相提取物进行初步分 水相提取物中仍含有大量水溶性较好的季胺生物 离，之后对硅胶柱层析得到的流分进行HSCCC分 碱，如果经硅胶柱层析初步分离后，继续采用硅胶 离，旨在建立一种操作简单，从岩黄连水相提取物 柱层析进行较为精细的分离，会产生十分严重的不 中分离得到生物碱单体化合物的方法。 可逆吸附，既影响收率，也容易产生拖尾现象，影响 1 实验部分 分离效果。凝胶柱层析和C，。反相硅胶柱层析分离 1．1试剂与仪器 效果比硅胶柱层析好，但不可逆吸附始终存在，仍 柱层析硅胶(48～75“m，青岛海洋化工)；正 然会造成损失，而且成本也较高。 己烷、乙酸乙酯、氯仿、甲醇、正丁醇、氨水、乙酸、乙 收稿日期：2011-08-22；修订日期：2011-09-26