模板法制备导电高聚物酶传感器地研究.pdfVIP

模板法制各导电高聚物酶传感器的研究 塑豳丝，姜燕，阚锦霄 (扬州大学化学化工学院，225002) 随着生物技术的飞速发展，分离出的酶的种类越来越多。由于酶具有催化专一性、 高活性和催化高效性等优点，从而在生物传感器、制药工程、环境检测等领域发挥着越 来越大的作用川。而游离态的酶在应用上却受到很大的限制，特别将其用于对复杂体系组 成的测定既贵又不方便。 自1962年Clark等121用固定化酶首次制得酶电极以来，这样的电化学装置引起人们 很大的兴趣。1967年，Updike和Hicks”1研制成世界上第一支葡萄糖传感器，自此各种 类型的生物传感器相应问世，特别是近二十年来生物传感器得到了飞速地发展。常规固 定酶的方法如下表所示”1： 酶的固定化方法 厂——}_———] 包埋法交联法 载体结合法 厂上]厂——————] 格子型 微胶囊型共价结合法 离子结合法 物理吸附法 包埋法和吸附法固定酶，虽然对固定化酶的生物活性影响较小，但固定化酶很容易 从载体上流失，造成固定化酶的长期稳定性较差，虽进行了一系列改进研究，但仍不够 理想。而使用共价结合法和交联法将葡萄糖氧化酶等固定于载体上，虽可解决固定化酶 的流失问题，但常因交联或共价键合过程中需进行较激烈的反应使酶失去其催化活性。 并且常规方法中使用的载体一般为非导电体，当将固定化酶用作电化学传感器时．须在 测量体系中加入电子中继体实现反应信号的转换。这对许多分析系统是很不方便。 随着导电聚合物的出现，用导电聚合物固定酶构成生物传感器一度引起人们的广泛 重视。原因在于用导电聚合物固定酶。酶催化反应过程中的电子得失可通过导电聚合聚 物直接实现电荷的传递。这就克NT非导电聚合物在酶催化反应过程中不能实现电荷直 接传递的不足。用导电高聚物固定酶制各的酶传感器有快速的电荷传递能力以及易变灵 活的化学结构，并且用导电高聚物制成的酶传感器通常有快速的响应、很好的操作稳定 性、比较长的保存时间以及较低的成本。自Foulds[51等首次报道用导电聚合物固定酶，至 今用导电聚合物构成酶生物传感器，主要由结构型导电聚合物采用化学或电化学的方法 固定酶。电化学法有～步法”和“两步法”。所谓“一步法”就是在导电聚合物的单体聚 合的过程中将酶直接包埋于聚合物中，“一步法”简单、价廉，但单体和聚合时所用介质 常严重影响酶的活性。而“两步法”是先在电极上合成导电聚合物膜，再根据导电聚合 物的掺杂和去掺杂机理，在温和的条件下将偏离等电点的酶分子在导电聚合物电化学氧 +通讯联系人：龋锦晴．Tel：0514—7975590转9415 50 化还原过程中掺杂进聚合物中。这就避免了形成生物传感器过程中因激烈的反应而影响 酶的活性。然而，“两步法”固定酶受导电聚合物粒子间距离的影响．对粒子间距离小于 酶分子粒径的导电聚合物，酶分子只能附着在导电聚台物的表面，这将导致测试过程中 酶易从导电聚合物膜中脱附，使酶传感器的稳定性受到明显影响。 在前者工作的基础上，我们找到了一种固定酶的新的方法一“模板法”。其流程示意 图如下图1所示： 一矿一 峰二 ¨·o。一 ofthePANI-uricase Thescheme Fig．2Stability Fig．1 oftemplate process bio∞nsor，1 preparedtemplate， by 2prepa