癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞的杀伤细胞活性的研究.pdfVIP

全文刊曼 癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞的杀伤细胞活性研究 蒋敬庭，吴昌平，邓海峰，孙文辉，吴爱珍，陈国瑾 (苏州医学院附属第三医院肿瘤诊疗中心，常州213003) 摘要用生物技术提取癌性胸水中的肿瘤浸润淋巴细胞和相应的肿瘤细胞，经过一定时间诱导培养后， 在7天、14天、21天和28天分别检测T儿对自身肿瘤细胞和K562细胞的杀伤活性．结果显示：TIL对自身肿 瘤细胞和K562细胞的杀伤活性无显著性差异．三周时杀伤活性最强．提示临床可在TⅢ诱导培养三周时进行 临床应用，并可取得最佳疗效． infiltration 本室采用流式细胞术分析了胸水肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor 胞和K562杀伤细胞活性，旨在更好地选择具有最佳杀伤细胞活性的T1L应用于临床。 l材料和方法 1．1病例选择 后胸膜转移9例；贲门癌术后胸膜转移5例。36例均经病理学和(或)细胞学诊断为癌性胸水，胸水量中 等以上，由X线胸片及胸部B超观察胸水量的改变，均未接受癌性胸水的其他常规治疗。预计生存期3 个月。 1．2实验材料和方法 1．2．1材料RPMI 用含AB血清和IL-2的RPMl1640培养液调整细胞浓度为1．OX106／ml。收集相应肿瘤细胞内含lo％ 小牛血RPMI 液培养扩增。． 1．2．3细胞株K562细胞(人红白血病细胞株)，由中科院上海细胞所提供。 1．2．4 孔反应板加入效应细胞和靶细胞各100p1／孔，同时设靶细胞、效应细胞及空白对照孔，均用三个平行孔． 孔，再加人DMSO 150pI／孔，以溶解形成的色素颗粒，570nm波长下SLTm型酶标仪比色． 结果计算 TIL活性=(1一塞墼望畚舞鬈箦赣蛩案产)×100％ 2结果 TIL杀伤细胞的活性与肿瘤的发生、发展及转移呈负相关，是判断机体抗肿瘤水平和促进癌性胸水吸 收标志之一。经检测胸水T1L对自身肿瘤细胞和K562细胞杀伤活性发现，在三周时具有较高的细胞毒 性(均P0．05)，结果见表1和表2． ·311· 江苏省抗癌协会化疗专业委员会第五屠年会论文汇编 注：t检验，同一疾病比较，-P0．01 裹2Tm细胞在不同时间对K562细胞杀伤舌性(％) 注：t检验，同一疾病比较，鼍PO．05 3讨论 肿瘤授润淋巴细胞过继免疫治疗的特异性和疗效已碍到临床证实．癌性胸水中的淋巴细胞是一种特 殊形式TIL细胞，它能充分识别肿瘤细胞后杀伤肿瘤细胞，其杀伤细胞活性对癌性胸水的吸收与疾病的 恢复有密切的关系，同时TIL细胞活性测定也是评价所制备的TIL细胞生物物性的重要指标。 本室所分析的36例癌性胸水患者分别在提取胸水TIL同时分离出自身肿瘤细胞，同时分别进行诱 自身肿瘤细胞及K562细胞的杀伤活性最强，杀伤细胞活性与培养时间存在着一定的关系。但TlL对自 身肿瘤细胞和K562细胞的杀伤活性无显著差异，提示实验室可直接采用K562细胞作为靶细胞来检测 TlL杀伤细胞活性。由此可见，在迸行三周培养后的肿瘤浸润淋巴细胞可达到最佳杀伤胸腔内转移的肿 瘤细胞的能力。它可以引起肿瘤供血血管的损伤，使其闭塞，减少血流而发挥抗瘤作用，促进胸腔积液的 吸收。本实验结果显示：癌性胸水TIL经体外诱导培养三周时具有较强的杀伤细胞活性，此时临床应用 可取得可靠的疗效。 ·M2·