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医药学与生物学分册 363
空间环境对玉米诱变效应的研究。
孙野青赵海成梅曼彤黄荣庆
(哈尔滨工业大学生命科学与工程系.哈尔滨.15000
摘要 为了研究空间环境对植物种子的诱变机理,我们利用返回卫星搭载
了玉米种子,对空间环境的诱变机理进行了研究。’我们把在第一染
色体上含有隐性柠蒙白基因(z“)和显性基因(L训)杂合体的玉米
种子,用核径迹探测器包装,搭载在返回式卫星上,在太空中飞行了
15天。收回后,对当代及其后代进行了表型和分子生物学水平的研
究,并对击中这些种子的高能重粒子数量及能量进行了分析。研究
结果表明,约有10%当代和40%的自交后代的叶片出现了黄色条
纹、矮小、异常花器和黄绿植株。在叶片上出现黄色条纹的植株作
为观察空间环境诱变的主要指标,发现条纹出现率在第一代为
4,6%。在自交第二代为35.5%。并且,高能重粒子击中胚部的数量
与植株的变异频率有正相关倾向。为了在分子水平上研究其变异
情况,我们用110个随机引物进行了RAPD分析,变异组和正惜对
照组比较有10.9%的引物出现了多态性条带,并且发现在同一表型
变化的后代中出现了同类型的条带。
关键词 空间诱变 有杂合隐性柠蒙白等位基因的玉米种子高能重粒子
RAPD分析
最近,对于空间环境对檀物的生长和发育的生物学效应,已经做了大量的研究…。
发现了经返回式卫星搭载而出现丰产的新变异品系”】。因此。返回式卫星是研究空间环
境作用于植物种子生长发育的实验装置。然而,这些现象的生物学意义及生物效应的分
子生物学机制是否与空间辐射相关仍然没搞清楚。已有报道,暴露于空间离子辐射环境
中的活体组织出现了损伤作用”’4’5’61。在很广泛的各种空间辐射的粒子中,重粒子是最
有效的一类。
在本课题研究中,我们测定了辐射剂量,特别检测了穿透卫星屏蔽的高能重粒子。
为了研究单个空间重粒子的辐射生物学效应,我们用核径迹探测膜夹心玉米种子(Zea
Mays)形成三明治样的生物叠,搭载在返回式卫星上,飞行15天后收回,种植观察了其表
型变化、高能重粒子击中胚的数量、变异率及NDA多态性改变。
t本研究是国家自然科学基金资助项目(批准号:3968007)。
364 2000年中国博士后学术大会论文集
1材料
200粒玉米种子搭载在返回式卫星上.从1996年】O月5日到20日。以36度倾角。
175/320公里的近地轨道,绕地球共飞行了15天。其中100粒玉米种子被固定在两块
7cm×8era的有机玻璃板上,用cR39塑料核径迹探测膜行夹心包装,以定位注入的高能
重粒子数及相关物理参数。用同样的固定包装设地面对照组。所用的实验材料都是从
合体的玉米种子,这种玉米种子如果有胚的Lwl发生突变就能引起植株叶子出现黄白条
纹o…。
2辐射检测
主要是通过分析搭载的径迹探测器和氟化锂计量器来获得。当返回式卫星返回地
面后,用最佳蚀刻条件立即蚀刻处理,在光学显微镜下扫描识别重粒子径迹并测量径迹
参数,按照单一粒子所反映的探测器校订阈值,用饰刻径迹几何的标准相关性检测了粒
子入射角和坐标。通过高精确径迹标记和固定击中植物种子位点的方法,我们计算出被
z/B10和z邝≥50单个重粒子(z为原子序数,p为v/e,其中v为粒子的速度,c为真空中
的光速)贯穿或停留在玉米种子上的数量。辐射剂量被氟化锂计量器检测并经计算机加
以分析。
3田间观察
1997年3月,将空间飞行的种子返回后与地面对照种子一同种植在广州华南农业大
学的实验地里,考察了这些植株的生长、发育和表型特征。研究了第一代及自交产生的
第二代的变异情况,在叶片上出现黄/fa条纹被作为选择表型变异的生理指标。
4 RAPD分析
选择了一些有表型变化实验组和对照组进行了随机扩增多态性DNA分析。从新鲜
冷冻的叶片组织用略加修订的CTABt”方法提取基因组
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