ATP和COA活化癌性胸水TIL的增殖力和杀伤活性的研究.pdfVIP

大会交流 邓海峰，蒋敬庭，吴昌平，孙文辉，陈国瑾，吴爱珍 (苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心．江苏常州213003) 癌性胸水TIL的培养液．在7天、14天、21天、28天分别计算其增殖力，测定其杀伤细胞活性．结果：单一的完 液输注所需的T几数量．结论：培养液中加入ATP和COA可以活化癌性胸水T几的增殖力与杀伤活性，对I临 床应用有一定的实用价值。 infiltration 本室曾采用低浓度IL-2诱导培养癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞(Tumourlymphocytes， TIL)取得一定的效果，并对癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞的生物学特性进行了研究，同时应用此法治疗了 伤细胞活性。 l资料与方法 1．1 病例 12例癌性胸水患者，男性7例，女性5例。年龄53～72岁，均经病理学和(或)细胞学诊断为肺癌伴 胸膜转移，由X胸片及胸部B超观察胸水量为中等量以上，均未接受癌性胸水的其他常规治疗。 1．2材料 1．2．1 药厂)，淋巴细胞分离液(上海试剂二厂)，白细胞介素一2(IL-2．北京四环生物工程制药厂)，四甲基偶氮唑 盐(M1vr)和十二烷基磺酸钠(SDS．华美生物工程公司)． IL-2。2×10-5mol／L2一巯基乙醇、1％丙酮 1．2．2本室培养液：RPMll640含10mmol／L Hepes、100u／ml 养液系统中加入三磷酸腺苷二钠5ug／ml，辅酶A0．025u／ml，作为应用液。 1．3方法 加入相应培养液扩增。 1．3．2癌性胸水TIL细胞增殖力测定：应用上述两种不同培养液，均匀扩增后移置96孔板，每孔加’ 钟脉冲效(cpm)． 1．3．3癌性胸水细胞杀伤活性测定：采用肼比色法测定TIL细胞对K562作为靶细胞的杀伤活性 l 效靶为201。 1．4统计处理 各组问采用方差分析及t检验。 ·125。 江苏省抗麓协会化疗专业委员会第五届年会论文汇翁 2结果 2．1 加入ATP和CoA对于癌性胸水TlL增殖力变化 分别提纯出12例癌性胸水中含足够量的TIL100ml(浓度为1．0X 6孔板中，分别采用CM液和本室应用液(CM+J钔限+COA)培养，按上法测定TIL细胞增殖力。 表l 12例癌性胸水T也中加入不同培养液其扩增过程的变化(X士S，×10／m1) 注：t检验，-P0．05 2．2 TII。在两种培养泣中扩增能力比较 TIL在含有100u／ml 可见，在CM中加入ATP和COA可明显提高TIL的扩增能力。 2．3加入不同的培养演TlL杀伤细胞活性分析 杀伤细胞活性与肿瘤的发生、发展及转移呈负相关，是判断机体抗肿瘤水平和促进癌性胸水吸收标志 着培养时间的延长，这两种培养液可以解除这种抑制。当培养至14天时，含有ATP和CoA的CM培养 液Tll，其杀伤活性明显增强(PO．05)，结果见表2。 裹2 11L细胞在不同培养液中对K靳2细胞杀伤活性比较(X士2SD．％．n—12) 注：t检验，瞢Po．05 3讨论 肿瘤浸润淋巴细胞的特异性及疗效等已得到临床的验证。但其特异性与杀伤活性与培养液中的成份 磷酸键．参与脂肪、蛋白质、糖、核苷酸的代谢，在Tm细胞培养过程中，加入ATP可分解成二磷酸腺苷及 磷酸基时能放出大量能量，以供给TIL细胞吸收及进行生化合成等需要能量时之用，以改善与提高细胞 酶的代谢功能，从而促使了TIL的增殖与杀伤活性的提高。即酶有加速受损细胞功能恢复的作用，对 11L细胞的糖、脂肪及蛋白质的代谢起重要作用． 本项研究结果显示：在CM液中加人一定量的ATP和COA培养TIL细胞可明显扩增T几的数量， 10。／ml，同时杀伤活性显著增高，可达(5＆12 扩增能力增加约—储．在14天时即可达