澳能霜对小鼠接触性皮炎作用地研究.pdfVIP

澳能霜对小鼠接触性皮炎作用的研究 谭雪晶刘晓明 大连医科大学附属一院皮肤科 ≈摘要] 目的探讨澳能霜对小鼠变态反应性接触性皮炎的治疗作用及其作用机制。方法应用二硝 因子的抑制发挥作用冬 澳能霜(含0．05％卤米松一水合物)是香港澳美制药厂生产的一种外用强效皮质类固醇激素。为探讨 其对接触性皮炎的作用机制，我们利用小鼠变态反应性接触性皮炎动物模型，观察澳能霜的作用及其对血 清IL一4、IL一12、IFN_Y水平的影响。 一、 料和方法 (一)实验动物及分组：雌性健康BALB／C小鼠，体重25—30克，由我校实验动物中心提供。 (二)试剂及药物：2，4一二硝基氟苯()，以4：1丙酮橄榄油为基质，配成0．2％和0．5％两种溶液。 实验组为澳能霜(0．05％卤米松霜)，香港澳美制药厂生产：阳性对照为恩肤霜(0．02％丙酸氯倍他索霜)，徐 物制品公司。 (三)实验方法： u 去毛部位涂0．5％DNFB25p1，每日1次致敏。第6日于小鼠左耳背面涂0．2％DNFB201诱发皮炎，右耳背 涂基质20ul对照。- 验组、阳性对照组、阴性对照组。诱发后6小时开始用药，涂于左耳背，稍按摩，每日2次。 3．观察指标： 1)诱发前和用药24小时及72小时后用测微尺测量小鼠左右耳中部厚度，计算诱发前后左耳厚度差 及用药后左右耳厚度差： 2)用药后24小时及72小时用直径6mm金属打孔器在左右耳中部打孔，取耳组织块，用分析天平称 重，计算左右耳重量羞； 3)鼠耳组织做石蜡切片，HE染色，光镜下用网形目镜测微尺计数真皮内单一核白细胞和多形核白细 胞数。 中凝固离心，分离血清，置于-25C冰箱中备检。采用ELISA法，操作步骤按说明书进行。将样本和标准 u 品100 u l加入反应板各孔中，37℃孵育90分钟，洗板。加入生物素化抗体工作液100l，37。C孵育60 u 分钟，洗板。加酶结合工作液100l，37℃孵育30分钟，洗板。加入显色剂100ul，37C孵育10一20分 根据标准曲线测出各样本IL一4、IL一12、IFN—Y浓度，单位为pg／1。 5．统计学方法：采用SPSSIO．0版本统计软件对各样本进行t检验。 二、结果 1．药物对小鼠诱发皮炎后耳厚度及重量差的影响： 用药后24h澳能霜和恩肤霜组及用药后72h澳能霜组与基质比较，均明显抑制DNFB所致的鼠耳厚度 左右耳厚度差及重量差无明显差异。见表卜表2。 表1用药24h对小鼠耳厚度及重量差的影响 表2用药72h对小鼠耳厚度及重量差的影响 2．药物对小鼠诱发皮炎后真皮炎症细胞浸润的影响： 基质组HE切片中真皮内单一核细胞及多形核细胞数目明显增多，澳能霜与恩肤霜组用药72h后可明 用药时间延长抑制作用增强。见表3。 表3小鼠耳组织切片多形核白细胞及单一校细胞比较(-1-／m2) }p0．05十却0．01 3．药物对小鼠诱发皮炎后血清细胞因子影响： 表4用药72小时小鼠血清IFN-Y、IL-4、IL-12水平(pg／n1) 三、讨论 澳能霜的主要成分为0．05％卤米松，它是一种强效的含卤基的糖皮质类固醇药物，具有良好的抗炎、 抗过敏、收缩血管和止痒作用，其外用主要治疗非感染性炎症性皮肤病如脂溢性皮炎、接触性皮炎、湿疹、 神经性皮炎等。恩肤霜主要成分为0．02％丙酸氯倍他索，为临床常用的强效激素类药物。 113 接触性皮炎(ACD)为临床常见Ⅳ型变态反应性皮肤病。我们应用小鼠ACD模型，将澳能霜与恩肤霜 对比，研究澳能霜的抗炎效果及作用机制。小鼠ACD的炎症反应高峰出现在诱发后24h”1，我们于诱发后 抑制作用，较恩肤霜抗炎作用强，作用持久。 目前认为，持续性Thl细胞