白腐真菌的DNA提取与RAPD研究初探.pdfVIP

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2017-08-16 发布于安徽
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白腐真菌的DNA提取与RAPD研究初探.pdf

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．10．微生物生态学研究进展——第五届微生物生态学术研讨会论文集白腐真菌的DNA提取和 RAPD研究初探① 马丽华谢冰黄民生 (华东师范大学环境科学与技术系，上海200062) 摘要：本文探讨了提取真菌DNA的方法，采用改进的蜗牛酶法，液氦研磨+饱和酚抽提法两种方法，从白腐真菌菌丝体中提取DNA．用电泳、紫外吸收光谱进行鉴定。结果显示：蜗牛酶法 DNA破碎少，产量高；液氯研磨+饱和酚法，DNA产量高，但破碎严重。采用RAPD技术对两株未知的白腐真菌从DNA碱基序列上进行了初步研究，试验了影响RAPD结果的一些因素。结果表明， DNA模板浓度及Mg抖浓度对扩增影响较大，而dNTPs和Taq酶浓度在小范围内变化不会影响扩增结果。RAPD扩增结果表明，试验的白腐真菌紫外线诱变前、后DNA序列发生了较大的改变。关键词：DNA提取RAPD白腐真菌紫外诱变 The ofDNAExtractionand Study RandomlyAmplified DNA(RAPD)ofWhiteRot Polymorphic Fungi MALihuaXIE HUANG Bing Minsheng ofEnvironmentalScience。EastChinaNormal (Dept University．Shanghai，200062) methodsof thecellular andsnailell— Abstract：Two wall·liquid grinding breaking nitrogen wereused DNAofwhitefun— aswellassaturation toextract rot zyme phenol，high—saltdeposition inthis resultsof and demonstratedthat gi paper．The UV—spectrumgeleleetrophoresisanalysis celluarwallof andDNAextractedthis was snail couldbreakthe effectively by way enzyme fungi in andwaslittlebroken．RAPDwasusedto theDNA oftwo the study sequence highestoutput differentwhite resultshowed oftheDNA oftwowhite fungi．The significantchanges sequence beforeandafter fungi UV(ultraviolet)mutagenesis． rot words：DNA