葡萄叶片白藜芦醇地研究.pdfVIP

ThirdInternationalOnⅥticultureand 第三弱国际葡萄与葡麓滔学术研讨会论文集Proceedingsofthe Symposium Enology 葡萄叶片白藜芦醇的研究 李华张振文马远张予林 (西北农林科技大学葡萄酒学院，陕西杨凌712100) 提要本研究采用高效液相色谱法测定了葡萄品种梅尔诺和8804叶片中的白藜芦醇含量， 分析了葡萄叶片生长过程中白藜芦醇含量变化及霜霉病对葡萄叶片中白藜芦醇含量的影响．取得 的结果是：葡萄叶片不同生长时期内白藜芦醇的含量变化规律和葡萄叶片霜霉病感病程度与白藜 芦醇的含量的关系。 关键词葡萄叶片；白藜芦醇；霜霉病 然界中主要以反式构象存在。其中葡萄中含量最高，也存在于许多葡萄制品如葡萄酒中，是葡萄受到真菌 侵染或紫外线照射等环境胁迫而产生的一种芪类植物抗毒素。众多的药理学试验表明，白藜芦醇对人体具 有医疗保健作用，它具有化学抗癌活性，可以作为抗氧化剂和抗突变剂【11；它能阻止血小板凝聚，抑制类 花生酸的合成，调节脂蛋白代谢，可以在预防心血管疾病方面发挥作用【2】，可以清除自由基、治愈淋病、 脚癣、毛囊癣，化脓性皮炎、变应性疾病和炎症【3一_～，因此引起了全世界科学家的高度重视。植物组织 在正常条件下只能合成极少量的白藜芦醇，较大量的合成需要外界生物和理化因子的胁迫来诱导。上世纪 90年代以来，国内外对葡萄及葡萄酒中自藜芦醇的保健作用，测定方法进行了大量的研究，但国内尚未见 到关于葡萄叶片中白藜芦醇含量变化规律的研究及叶片对霜霉病感病程度与叶片中自藜芦醇含量关系的 研究。本研究用高效液相色谱法对不同生长时期叶片中自藜芦醇的含量，不同霜霉病感病程度的叶片中自 藜芦醇含量进行了测定，寻找葡萄叶片中白藜芦醇含量变化规律以及叶片感染霜霉病的程度与白藜芦醇含 量的关系。 1材料与方法 l。l材料 本研究于2002年4月一11月在西北农林科技大学进行，所有的试验材料都取自于西北农林科技大学 葡萄酒学院张家岗酿酒葡萄栽培基地。试验研究品种：梅尔诺，8804(树龄4年)。 1．2方法 1．2．1材料的预处理 本试验从葡萄萌芽不久，每隔lO天采一次样，采样的每一个叶片都位于枝条的第四节位，直至葡萄 集上清液，重复提取3次，提取液过滤后，经石油醚洗脱2次，再在40℃充氮条件下吹干，用lml甲醇溶 p 解残留物定容。此溶液经0．45m脂溶性微孔滤膜过滤后上机待用。 一164— 所有的提取操作均在避光条件下进行，以避免白藜芦醇分解和发生异构化反应· 1．22 高艘液相色谱法测定葡萄叶片中的白孽芦醇含量 色谱条件：采用岛津液相色谱体系，检测器为紫外光检测器。其他色谱条件斟入表I。每次在进样之 前，以甲醇冲洗色谱柱30分钟。 囊1 膏蕴藏相色谱(HPLC)条件 鱼堂堡 墨竖要塑鱼堂 自镕# shinp∞kⅧ或ID46∞x15Gram 进样量 10ul 撞测器 紫外橙潜器 瘫建 1衄ⅢⅢm 藏动相 E腈：水=∞：60(V：V) ±些 !g些 1．23 白孳芦醇定性定量分析置所用试荆 根据标样在210-390的紫外吸收光谱图和保留时间对样品中所舍的白藜芦醇进行定性分析，样品中自 藜芦酵的含量的定量分析采用外标法。所用试剂如下： 陆忠化学试荆厂。甲醇分析纯，西安化学试剂厂。石油醚：分析纯，沸程60～9C．西安化学试剂厂。水：重 蒸水(超纯水)。 2结果与分析 2I高效液租色谱法(HPLC)测定葡萄叶片中自藜芦醇的含量的保留时间