[王镜岩生物化学第三版笔记]第十四章 RNA的生物合成.pdfVIP

第十四章 RNA 的生物合成 RNA 的生物合成包括转录和RNA 的复制。 转录（transcription ）：以一段DNA 的遗传信息为模板，在RNA 聚合酶作用下，合成出对应的RNA 的过 程，或在DNA 指导下合成RNA。 转录产物：mRNA 、rRNA、 tRNA、小RNA 除某些病毒基因组RNA 外，绝大多数RNA 分子都来自DNA 转录的产物。 转录研究的主要问题 ①RNA 聚合酶 ②转录过程 ③转录后加工 ④转录的调控 ①~③是基本内容，④是目前研究的焦点，转录调控是基因调控的核心。 转录与DNA 复制的异同： 相同：要有模板，新链延伸方向5’→3’，碱基的加入严格遵循碱基配对原则。 相异：①复制需要引物，转录不需引物。 ②转录时，模板DNA 的信息全保留，复制时模板信息是半保留。 ③转录时，RNA 聚合酶只有5’→3’聚合作用，无5’→3’及3’→5’外切活性。 转录是基因表达的第一步，也是最关键的一步。 基因表达的终产物：①RNA ②蛋白质 转录过程涉及两个方面 ①RNA 合成的酶学过程 ②RNA 合成的起始信号和终止信号，即DNA 分子上的特定序列。 DNA 正链：与mRNA 序列相同的DNA 链。 负链：与正链互补的DNA 链。 转录单位的起点核苷酸为+1，起点右边为下游（转录区），转录起点左侧为上游，用负数表示：-1，-2， -3。 第一节 DNA指导的RNA合成（转录） RNA 链的转录，起始于DNA 模板的一个特定位点，并在另一位点终止，此转录区域称为一个转录单位。 一个转录单位可以是一个基因（真核），也可以是多个基因（原核）。 基因的转录是有选择性的，细胞不同生长发育阶段和细胞环境条件的改变，将转录不同的基因。 转录的起始由DNA 上的启动子区控制，转录的终止由DNA 上的终止子控制，转录是通过DNA 指导的 RNA 聚合酶来实现的。 一、 RNA聚合酶 RNA 合成的基本特征 ①底物：NTP （ATP、GTP、CTP、UTP ） ②RNA 链生长方向：5’→3’ １ ③不需引物 ④需DNA 模板 反应： RNA聚合酶/ DNA模板、Mg 2 n ATP n GTP nCTPn UTP    RNA n n ( 1n 2nPPi3 4) 1 2 3 4 1、 E.coli RNA聚合酶（原核） E.coli 和其它原核细胞一样，只有一种RNA 聚合酶，合成各种RNA （mRNA、tRNA、rRNA ）。 一个 E.coli 细胞中约有 7000 个 RNA 聚合酶分子，在任一时刻，大部分聚合酶（5000 左右）正在参与 RNA 的合成，具体数量依生长条件而定。 E.coli RNA聚合酶全酶| （holoenzyme ）分子量46 万Da，由六个亚基组成，α ββ’ σω，另有两个Zn2+ 。 2 无σ亚基的酶叫核心酶，核心酶只能使已开始合成的 RNA 链延长，而不具备起始合成活性，加入σ亚 基后，全酶才具有起始合成RNA 的能力，因此，σ亚基称为起始因子。