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A028 气相色谱法在植物生理研究中的应用 袁敏 张铭光 (华南师范大学分析测试中心，广州510631)(华南师范大学生物系) 在植物衰老、生殖生理、采后生理等植物研究中，二氧化碳(c。I)、乙烯(QI-h)含量的测定非常重要。通 常Oq与QH‘含量需用两种不同的仪器测定，如二氧化碳选用红外C．Zh分析仪测定，C2H。则用气相色谱 法测定。曾报道可以用气相色谱的氢火焰检测器(FID)铡定O晚及岛H…【“，但值物组织产生的。五含量 较高，而C2H含量较低，两者含量相差悬殊，往往由于002峰面积太大而掩盖QH出峰，用FID很难同时 准确测定这两种气体含量。热导池检洳器(ⅡD)具有通用性、不破环样品、灵敏度较FID低等特点。选择其 测定c。l而用高灵敏度的FID测定c2弛。在这思想指导下，研究二维气相色谱一双检测器联用技术L3J 用于同时测定。现及岛H，这样不仅使测定简化，而且可使材料在同一条件下测定，实验数据将更准确。同 时还研究了柱长、柱温对测试的影响，并选出最佳条件。该方法的值物生理研究工作中具有积极意义。 1材料与方法 1．1仪器与试剂 100ml注射器。 1．2色谱操作条件 1．2色谱操作条件 N2：30mlmin一。进样量：0．5砌，电流：80mA 1．3实驻设计 样品进样后，经色谱柱分离，进人TCD检测器测定00-在TCD出口处接收集柱，样品继续进入FID进 行岛H4测定，在连接积分仪处接切换闲，分别记录效据。 2结果与讨论 1．1植物材料中岛I-t,032的测定 由于沙田柚中乙烯释放量较步，较难测定，本实验称取209抄田柚皮放人100ml注射器中，注射器柚至 100ml，密封后放置1小时进行铡定，色谱图见图4。 图4沙田柚皮中释放c2H．∞2的气相色谱圈 of Rg，4The：hr!I：gnrele越ing岛凡岫d哂hom阳r呻of蛐出|dd诎． 30m1．xrh一1； H． (哗k)：1．杂质(hp耐节)2．O晚3．G 计算：Oh释放速率=Q珏×(a00mL—V备)／(w甘xt) Q0．释放速率=Cc2H．×(100mL—V甘)“W材×t) 其中c∞．-Oh的浓度，Cc2}-l：c2I-h的浓度，V材：材料占注射器的体积，t材料故 置时问。 百一 2．2讨论 二维色谱一检测器联用技术测定植物材料的caI-h、O晚，具有快速、准确、灵敏度高、省材等优点。本 法测定0呸的最少检测量30plL～，采用此方法，已做了荔枝、绿豆胚芽、花生等各种植物材料，结果较理 想，完全满足植物材料的要求。 植物材料中CCh的含量较多，QH4的含量又非常少，如果选用单检测器(FrD)，FID灵敏度较高，大量 的Oq出峰会盖少量的C2地出峰；而选用单检测器(H卫)，则T(卫检测器灵敏度较低，微量的QH2难以 检出。把这两者有机地结合起来，正好解决了它们的浓度差异造成测试困难。 TCD检测样品时不破坏样品，在其出口处接收集管，使样品继续进FID检测，这样可避免样品扩散，减 少死体积，得出较理想的色谱圈。 选用经过修饰的Porapak N填充柱，Q心与O。2与∞±的分离度为2．2，两者完全能分开，这种柱的特 点不怕水，故不会因为植物在呼吸过程中产生的水分而影响柱放。 植物材料差异较大，通常在实验中遇到由于选材时间不同，或不同批材料，使烈定数据产生误差。选用该 方法同时酒定QH}与。瑰，可减少这方面的误差。 柱长、柱温是测试准确的重要因数。实验结果表明，色谱柱长选择2m，柱温选择70℃较合适。 参考文献 [1】囊步敏，气相色谱法测定∞l的释放敷率．植物生理学通讯，1990．(3)：49—50 [3]俞维乐，欧庆瑜．毛细管气相色谱和分离分析新技术，北京淬}技出版杜，1999，599—600．