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基于分子计算的ADTZ催化
AFBl—AFBl抗体复合物中抗原表位改变的研究s
刘大蛉、林伟雄、谢春芳、姚冬生9
暨南大学生命科学院生物技术实验室
姚力新
广东药学院药物研究所
作者在以往报道用固定化载体活性碳、壳聚糖、纤维素固定AFT解毒酶
(彳D眩)研制的生物反应器只能处理ppb级污染的AFT，而对于更微量(ppt级)
污染的AFT，这些酶固定技术并不能解决，在实际运用中ppt级的AFT解毒处理，
如牛奶中AFM。的去除，更具有重要的价值。用特异性抗体作为配基设计的亲和
层析不仅可分离出样品中的抗原，实际上也是对样品中抗原进行了富集。酶如果
能够对抗体配基所富集的特异性抗原继续进行催化，而且催化产物与原来抗原有
不同的抗原表位，就有可能把亲和层析的这种富集作用与酶催化变构结合起来用
于改良固定化酶反应器，以达到对微量样品的生物转化。
分子理论计算结果：
黄曲霉毒素臣解毒酶对I族黄曲霉毒索的催化过程如下： ．
Enzyme
8
Aflatoxln d,wnolfAHD融
Afls帖xin-9捌巾硝油Hehvdk
INDIG02
在Silicon IMPACT工作站上用C喇us23．0软件对
Graphls
AFMI／AFBI和解毒后产物越m∞酬舢；趣)P进行计算，结果表明产物分子的可及
转角全部发生变化，即使一级结构保守的部分也发生了明显的变化。原子间的键
142
生变化。这预示产物(抗原)的抗原表位也会随之发生变化。
@罐
AFBJ及其产物ABI-IDP分子的三维空闻构象
ADTZ催化AFBl—AFBl抗体复合物中AFBl的变构的实验结果：
TotalAflatoxin
用竞争ELISA试剂盒(AgraQuantTM 4／40，ROMER公
Assay
司产品)进行如下的实验。试验组(黄曲霉毒素解毒酶作用组)：酶标板样品孔加
入样品AFBI，25℃孵育30分钟，洗板4次。然后加入ADTZ25℃温育30-90
灭活酶组和质控组，各组设8个平行复孔。以上实验重复6次。各孔中AFB。从
AFBl—AFB。抗体复合物上变构解离的量和百分率由标准曲线计算得到。结果：
0．224ng／ml；越璐I—AFBI抗体复合物上变构解离的百分睾为：69．1曲9．9％。
实验的结果表明：黄曲霉毒素解毒酶能够使已结合在酶联反应板AFBl抗
体上的AFBl解离，即黄曲霉毒素解毒酶能使AFBI抗原表位改变并从AFBl抗
体上解离。这也提示：把特异性抗体作为配基对样品中抗原(酶的底物)进行亲
和富集，然后用酶对抗体配基所富集的酶的底物(特异性抗原)继续进行催化变
构的两个过程结合起来，达到对微量样品的富集催化解毒，以及亲和载体“自我
再生”是有可实现性的。
010418)
+本内容受国家自然科学基金(项目号t广东省自然科学基盘重点基金(项目号t
瓷助．
143
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