天花粉蛋白片段的分子克隆与生物学活性研究.pdfVIP

3～168 全国第二强中医药免懂学术研W会 2∞1年{|月l 细胞凋e：，从而达到治疗缓解疾病的效果。为了探讨二氧化_二砷是否可用1：治疗其他 的恶性肿瘤，本实验采抖{胃癌细胞株790l测试三氧化二砷抑制其增殖竹：用，并探讨 r作用机理。方法：将790】细胞株生长于载玻片L，代细胞生长连成片后分别加入 不同浓度的三氧化二砷，继续生长2d后用TUNEL染色，在荧光显微镜下观察细胞凋 u 亡发生率。结果：当加入三氧化j二砷浓度为5g／m1时，细胞出现坏死，表现为细胞 u 成片脱落，将脱落细胞离心涂片观察发现细胞均为碎片；当j氧化二砷浓度为0．5 ∥ml时，细胞少量脱落，经TUNEL染色见有凋亡细胞存在，凋亡率为60％左也。肖 u 。二氧化二砷浓度为0．05g／m1时。细胞不发生脱落，生长无变化，TUNEL染色未见 明显细胞凋亡，相反细胞出现分裂增殖旺盛现象，表现为核分裂象增多，细胞体积增 人，细胞数量增加。结论：在适当的浓度F，二氧化一：砷具有诱导胃癌细胞株凋亡的 作用。提示三氧化一：砷除厂可用丁．治疗自血病，还具有治疗消化道肿瘤的可能。 天花粉蛋白片段的分子克隆和生物学活性研究 李宁丽沈佰华沈天伟戴可铮王利柏峻 上海市免疫学研究所上海第二医科大学 为24KD。为葫芦科植物栝楼的块根中提取的有效成份以复式形式入药已有两f年的 历史。临床上用JI-引产、治疗葡萄胎和绒癌。免疫学的研究证实，天花粉蛋白是一个 良好的可溶性抗原，为24KD的大分子，天花粉具有多个功能抗原表位。本文报道了 _}{j基冈工程方法将天花粉蛋白进行分段研究，以期寻找天花粉蛋白的主要活性片段。 方法：PcR方法将天花粉蛋白基因克隆入pET-2d表达载体，转化至BⅥl表达菌r}· 表达。三个片段分别为：片段1(F1)长度为1．94氨基酸、片段(F2)：72．181氨基 酸、片段3(F3)：144，247氨基酸残基。将表达的蛋白进行复性后用于两种HLA遗 传背景的人群(M+，M。)的淋巴细胞增殖抑制试验，用3H-TdR掺入判断抑制率。结 果表明：片段1的和片段2的对M√M_抑制无明显著异，其中片段1的免疫F调作nJ 最弱，为16．3％片段2抑制率较高，达72．1％。片段3在M+，M。人群中的免疫卜．调作 Hj有区别，在M+人群中抑制率达91．】％而M。中仅22．1％。结论：分段表达的天花粉 片段具有生物学活性，这对减轻临床使用天花粉治疗时由天花粉大分子所诱发的免疫 ■● 兰堡!塑!!旦里璺!燮!翌丝 !塑!生!!皇!!：!!旦 副反应提供j-新的分子基础。其中片断2可能具有作为免疫抑制的活性与抗肿瘤药物 的潜力。而片断3对M+和M‘人群的抑制率的不同，其机理和意义j：i三1】1：研究之中。 义紫锥菊提取物SI与S2的免疫调节与抗病毒实验性研究 沈佰华聂红舍奇文马安伦沈天伟李宁丽 上海市免疫学研究所上海第二医科大学 紫锥菊是一种常见的本草生物，目前研究发现其有效成分为多糖。本文报道r该 多糖提取物的细胞免疫J：调作用。方法：现用环磷酰胺造成免疫力低卜的小鼠模型， 然后崩不同剂量的多糖喂饲小鼠，2周后断头处死小鼠，取脾脏作淋巴细胞转化试 验。样本细胞采用ConA作为缝裂原刺激细胞增殖，3H．TdR掺入试验检测小鼠的淋巴 细胞增贿能力．以服J【}j多糖组和使用安慰荆组的刺激指数作为评价多糖的细胞免疫上 调作川。用不同浓度的多糖提取物分别对柯萨齐病毒感染Hela细胞进行保护试验。 结果：细胞免疫功能上调：j}：常小鼠经环磷酰胺(CTX)处理(每次6mg／ml，0．2ml／ 腹腔注射／Sd)后，其免疫反应性受到明显抑制：SI为-5．3(与Il!常对照纰相比)。多 糖1能明显提高T淋巴细胞增殖活性，并具有正向调节作用和明显的免疫重建功能， u