应用傅里叶变换红外光谱的研究人乳腺癌组织.pdfVIP

应用傅里叶变换红外光谱研究人乳腺癌组织 沈世杰刘炳玉李清+马溪宋占军 (军事医学科学院国家生物医学分析中心北京100850) (军事医学科学院307医院病理科+北京1008501 摘要：傅里叶变换红外光谱方法可以用来研究细胞和组织等较为复杂的体系。细胞在 癌变过程中，涉及到蛋白质、糖蛋白、糖原等分子的含量变化，核酸和蛋白质结构的 变化，而且也涉及到细胞膜脂质体构型和构象变化等。揭示肿瘤细胞、组织与正常细 胞、组织之间的差异对于研究细胞癌变的可能机理及过程，以及实现肿瘤的早期诊断 具有重要的意义。 20例病理标本在冷冻切片机上切成约5岬的薄片，转移到镀金载玻片上使用配备 uMA 500红外显微镜的Bio—Rad FTS一65A傅里叶变换红外光谱仪测定。在实验考察的波 长范围内．发现恶性肿瘤与良性组织在红外光谱上存在明显不同的特征，我们的研究 发现，细胞发生癌变后组织细胞中核酸内磷酸二脂基团的氢键结合力增高，其次．糖 原的含量减少，蛋白质中某些氨基酸残基C一0H基团的氢键遭破坏，细胞膜脂质中距甲 基链结构平¨有序性发生改变等。从这些红外光谱的特征出发，就可以为乳腺癌的早期 诊断提供有黼的帮助。 近年来，随着傅里叶变换光谱及其相芙技术的迅猛发展．红外光谱不仅J“泛应川 r省自质、核酸等生物人分子的结构研究．而且已经Hj米研究细胞和组织等更加复杂 的体系。不同细胞、组织住红外光谱上有着不同的吸收频率和吸收强度，并且，在改 变样品所处状态时，其红外光谱会出现特征性的变化。 细胞在癌变过拌中．涉及剑蛋白质、糖蛋白、糖原等分子的含域变化，核酸雨l蛋 向质结构的变化…，而且也涉及剑细胞膜脂质体构硎羽I构象变化等。揭示肿瘤细胞、 组织与止常细胞、{11织之间的筹异对1：研究细胞癌变的机理及过科，以及实现肿瘤的 早期诊断贝订重要的意义。 1实验方法 1．1样品制器：20例摘理标本均米口：{07医院病理科。组织样品经手术后迅述放入液 氮罐中保存祷JH。每份样-1^往冷冻切片机f：笄切西片．一片转移刨镀金载破片上放至 审温后进{r红外光谱测定，兄片进行常规染色镜检．山有经验的病理医生进}r确理 时ffc{榆^。 1．2仪器条件：Bio—RadFTs一65A傅里叶变换红外光谱仪，配备uMA 500红外显微镜， 使用液氨冷却的McT检测器。分辨率为4cm～，扫描累加次数为256次，红外光谱收集 的光栏大小为50岬×50邶。操作软件为Bio—Rad公司提供的3200工作软件。 2实验结果 2．1磷酯键的红外吸收 良性组织与恶性癌变组织的红外光谱之间存在较大的差别，见图1。良性组织中 的最强红外吸收在124l和1082cm～，所对应的振动形式是磷酸二酯基团反对称伸缩振 1082cm—1)。恶性癌变组织的红外光谱 动(”asP02124lcm—1)和对称伸缩振动(VsP02 图中，磷酸二酯基团反对称伸缩振动强度减弱．对称伸缩振动强度增加，而且峰的形 状也发生了变化。同时，实验还发现，乳腺癌组织的红外光谱中磷酸二酯基团反对称 伸缩振动的频率向长波方向位移了2cm～。 不同病人乳腺癌组织中这两个峰的 强度以及强度比有所不同。这些吸收峰 的强度和形状可能反映出发生癌变和没 有发生癌变细胞的不同比例状态。 已有的文献证明“l，这些磷酸二酯 的红外吸收米白细胞核内核酸的磷酸二 酯骨架振动，细胞膜内酯类的磷酸残基 1000105011 001150|2吲25013∞ 所产生的