17β-雌二醇对骨髓间充质干细胞增殖和成肌分化作用的研究.pdfVIP

理想材料，有良好的生物相容性。具有防止或减轻术后粘连、改善肌腱滑动的作用，同时还可改善局部 皮肤组织修复的质量，是简单易行的粘连松解和防复发的方法，值得推广。 [关键词]脂肪移植；瘢痕；创伤愈合；组织移植 17β-雌二醇对骨髓间充质干细胞增殖及成肌分化作用的研究 陈翠平1罗新1谢静燕2姚润斯1王晓玉1李瑞满1蒋学风1 1.暨南大学附属第一医院妇产科 2.南京医科大学附属南京第一医院妇产科 [摘要]目的 探讨17β-雌二醇(17β-E2)对骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstem cells，BMSCs)增殖、成肌分化的影响，以提高BMSCs成骨骼肌分化效率，为压力性尿失禁(stressurinary incontinence，SUI)的注射疗法提供足量细胞，同时在细胞水平上探索雌激素治疗SUI的作用机理，为临床 用药提供理论依据。方法 利用贴壁法体外分离、纯化BMSCs，连续传代3次后，所有细胞用于以下实验： MTT法检测在0～1nmo儿浓度范围内17β-E2对BMSCs增殖活性的影响，以确定最佳的作用剂 量，Hoechst33258染色测定最佳作用剂量的17β-E2诱导后BMSCsDNA含量变化，以观察其对BMSCs增 殖的影响，同时以不含17β-E2的完全培养基培养的细胞为对照组；以10μmol/L5-氮杂胞苷(5-aza)诱导 BMSCs成肌分化，免疫荧光法检测添加不同浓度17β-E2诱导培养后BMSCs中骨骼肌分化标志肌球蛋白 重链(MHC)、myogenin、desmin表达情况，利用TUNEL法检测5-aza诱导BMSCs的凋亡率及添加17β-E2 后对药物诱导细胞凋亡的影响。结果 17β-E2可增强BMSCs增殖活性，且呈浓度依赖关系，最佳促增殖浓 度为1nmol/L；1nmol/L17β-E2诱导组与对照组BMSCsDNA含量随培养时间延长均呈增加趋势，培养48h 后两组差异无统计学意义，7d、14d时两组细胞内DNA含量差异有统计学意义。17β-E2可增加BMSCs 骨骼肌分化标志物表达，差异有统计学意义,P＜0.05。5-aza可诱导BMSCs凋亡，TUNEL阳性细胞率呈时 间依赖性增加，17β-E2可降低TUNEL阳性细胞率，差异有统计学意义,P＜0.05。结论 17β-E2对BMSCs的 增殖具有促进作用，且能增强5-aza诱导骨骼肌分化效率，降低药物诱导引起的细胞凋亡。 [关键词]骨髓间充质干细胞;雌激素;增殖;分化 studyon17β-estradioleffectsontheproliferationandmyogenicdifferentiationofbonemarrow mesenchvmalstemcells LUOXin*CHENCuiPing WANGXiaoyuLIRuimanJIANGXuefengXIEJingyanSHENYuan,YAORunsi*DepartmentofObstetrics andGyneclogy,TheFirstAffiliatedHospitalofJinanUniversity,Guangzhou510632,China AbstractObjectiveToinvestigatetheeffectsof17beta-estradiol(17β-E2)onbonemarrowmesenchymalstem cells(BMSCs)myogenicdifferentiationandproliferation,sothattoenhanceskeletaldifferentiationratioofBMSCsby 5-azacytidine(5-aza)induction,exploringpossiblebiologicalmechanismsonestrogentreatmentforstressurinary incontinence(SUI)atcellularlevel,andprovidingenoughcellsfortreatingSUI.MethodsBonemesenchymalstemcells wereisolatedfromSprague-Dawleyratsandpurifiedbytheabilitytoadheretotheculturalplasticinvitro.ThenBMSCs wereexpandedbysubculturesuccessively.AllthethirdpassageBMSCswere.uti