二极管阵列检测器用于判别液相色谱峰纯度时的局限性的研究.pdfVIP

LC-093 二极管阵列检测器用于判别液相色谱峰纯度时的局限性研究 刘永刚 赵颖彬 (中国工程物理研究院化工材料研究所。四川绵阳621900) 高效液相色谱法定性定量的基本前提是色谱峰由单一组分构成，因此色谱峰的纯度 P〔eak Purity)，即一个色谱峰究竟是由一种组分构成，还是包含了两种或两种以上的成分成为人们首先 关心的问题。二极管阵列检测器 (Diodearraydetector，简称DAD)的开发是过去10年内高效 液相色谱 (HPLC)技术的最重要进步，它用于研究及日常分析可提供最佳波长的确定、峰纯度的 判别及色谱峰的定性功能[(u。国内外己经有许多利用DAD对液相色谱峰的纯度进行判别的文献报 道。其主要方法包括在时间域里取两个波长下的吸收比，从色谱峰不同部位取光谱归一化，一个 或更多组分的光谱抑制和导数光谱技术[[21 使用这些方法判别峰纯度时都要求待测组分色谱峰中共洗脱杂质的紫外光谱明显不同于主组 分的紫外光谱。光谱间的差异越大，对于共洗脱杂质的检测限就越低[31然而，有机物的紫外光 谱一般均显示曲线变化不明显的宽带，缺乏能够说明细微差别的精细结构。尤其是对于那些生色 团相同，而结构上的差异部分又与生色团不同的化合物间的结构差异不能给予足够的描述[41。实 际上许多情况下例如同分异构体的杂质和主组分的降解或代谢产物与主组分在结构上是非常相似 的，这时利用组分的紫外光谱信息判别色谱峰纯度时就会遇到不能检测到分析物的共洗脱杂质的 情况，甚至有时候会给出完全错误的峰纯度结果，从而给下一步的定性定量分析带来很大的误差。 在痕煲分析中检测器的灵敏度起着很重要的作用。而二极管阵列检测器由于其为实现在线收 集光谱信息功能在结构上的特殊的设计，使得它的灵敏度相对于通常的单波长或可变波长检测器 要低，因此对于色谱峰中微量杂质的检测，有时DAD就会显得无能为力。 本文通过选择几种有代表性的炸药化合物为分析对象，对DAD用于判别液相色谱峰纯度时的 局限性进行研究。 1 实验部分 仪器和试剂:Waters高效液相色谱仪，配616泵，7125型进样器，996型光电二极管阵列检 测器，486型可变波长检测器，Millennium2010色谱工作站。HPLC纯乙睛，高纯水由Milli- Q(Millipore,USA)高纯水生成器制得;Tetryl,2,4,6-TNT,2,3,5-TNT均为西安近代化学研究所 国防科工委火炸药计量站提供。 色谱条件:色谱柱:Nova-PakvC,。柱，5pm,150mmX3.9mmi.d.(Waters,USA);流动相: 不同比例的乙睛一水体积比;流速。.8mL/min;进样量20匹:柱温为室温。PDA采集光谱的波长范 围是200-400nm，光谱分辨率为1.2nma 样品制备:用HPLC级纯乙睛作溶剂配制成质量浓度均为40mg/L的炸药标准参比溶液。实验 用的混合溶液根据要求按不同的配比使用标准参比溶液和HPLC纯乙睛来配制。进样前用。.45pm 滤膜 (Waters公司，USA)过滤。 结果与讨论 DAD用干色谱峰纯度判别 TNT和Tetryl是混合炸药TETRYTOL的主要成分，它们化学名称分别是2,4,6一三硝基甲苯 中国工程物理研究院科学基金资助项目(990559) 和2,4,6一三硝基苯甲硝按。二者在合适的色谱条件下可以被分离。从二者的紫外光谱 (见图1) 可以发现它们的紫外光谱形状几乎完全一致。事实上由于二者结构上的相似，在实际工作中由于 柱效下降或者分离条件偶尔变化有时仍然会遇到二者严重重叠或者共洗脱的情况。通过一根使用 过一段时间后的色谱柱得到的NTT和Tetryl质〔量浓度分别是TNT4mg/L,Tetryl0.4mg/L)的共 洗脱色谱峰，利用归一化光谱对照和吸收比值图法对该假单峰的纯度进行了鉴定，结果见图20 Tetryl 1 - … 1 二 月 . 1 2目月.:J. 为… 的‘.口 图1TNT和Tetryl的紫外光谱 n