秦皮总香豆素致突变作用的研究.pdfVIP

秦皮总香豆素致突变作用研究 王晓东邓治文彭晓华戴瑛赵军宁(四川省中药研究所) 变茵落数明显增加。而阳性对照组回变茵落数增加明显，均超过阴性对照组2倍以上。表明在正常试验条 件下，秦皮总香豆素在受试剂量范围内无致基因突变作用。秦皮总香豆素三个试验剂量组微核率均在正常 范围内，经卡方检验与阴性对照组比较无显著性差异(P0．05)，而阳性环磷酰胺组微核发生率明显高于阴 性对照组(P0．01)。表明秦皮总香豆素在本试验条件下对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核无影响。故可认为 所试秦皮总香豆素经Ames试验、小鼠骨髓微核试验检测，结果均为阴性，未见致突变作用。 关键词：秦皮总香豆素Ames试验小鼠骨髓微核试验 Y r 秦皮总香豆素系从中药秦皮提取的治疗痛风的有效部位。动物急性毒性试验、大鼠及比格犬长期毒性 试验、一般药理学研究均未见本品有明显毒性作用。我们应用Ames实验系统及小鼠骨髓微核试验系统进 一步考察本品的致突变作用，为临床安全用药提供依据。 1实验材料 1．1药品与试剂 受试药物：秦皮总香豆素提取物，灰白色粉末，含总香豆素96．07％，秦皮甲素91．68％，由四川省中药研 究所药化室提供，批号000601。』艋用时以无菌蒸馏水配成适宜浓度混悬液供试验用。 溶剂对照剂：一s9试验：为蒸馏水。+s9试验：为s9混合液。 Dan，60／19／ⅡlL，用于TAl02菌株，sigma公司生产，批号5222268)。 环磷酰胺由上海华联制药股份有限公司生产，批号001209。 s9和s9混合液：s9由本实验室用多氯联苯诱导大鼠肝制备而成。生物活性符合要求。液氮保存。s9 混合液由s9液和辅助因子组成，试验前按1：9配成10％混合液。 1．2动物及菌株 NIH小鼠，由成都生物制品研究所实验动物中心提供(合格证号川实动管质第20—6号)，喂以全价标 准颗粒饲料，试验在本室标准动物房进行(合格证。 验室。本实验室液氮保存。实验前各菌株经复苏并鉴定合格后用于实验。 2实验方法 2．1 菌株五项指标鉴定均合格。试验按要求设样品剂量组，阴性对照组，溶剂对照组和阳性对照组。样品设五个 平皿，分别进行加s9和不加s9试验。并重复试验一次。 ‘ 316 时间点微核无差异，于24小时脱颈椎处死动物，取股骨骨髓制片。吉姆萨染色后油镜阅片，每鼠计数1000 (NCE)数，并计算出PCE／NCE比值。微核率用SPSS 10．0统计软件进行卡方检验。 3试验结果 3．1 株与阴性对照组比较均未见回变菌落数明显增加。而阳性对照组回变菌落数增加明显，均超过阴性对照组 2倍以上。 一次给药24小时采样方法进行正式试验。由表3可见，秦皮总香豆素三个试验剂量组微核率均在正常范围 内，经卡方检验与阴性对照组比较无显著性差异(Po．05)，而阳性环磷酰胺组微核发生率明显高于阴性对 照组(P0．01)。 表1秦皮总香豆素Ames试验结果(回变菌落数／皿i±s)(第一次试验 注：以上数值为每剂量三个平皿结果的均值±标准差。 表2秦皮总香豆素Ames试验结果(回变菌落数／tmi±s)(第二次试验 注：以上数值为每剂量三个平皿结果的均值±标准差。 4结论与讨论 数明显增加。而阳性对照组回变菌落数增加明显，均超过阴性对照组2倍以上。表明在正常试验条件下，秦 皮总香豆素在受试剂量范围内无致基因突变作用。秦皮总香豆素三个试验剂量组微核率均在正常范围内， 317 经卡方检验与阴性对照组比较无显著性差异(P0．05)，而阳性环磷酰胺组微核发生率明显高于阴性对照 总香豆素经Ames试验、小鼠骨髓微核试验检测，结果均为阴性，未见致突变作用。(参考文献略) 表3秦皮总香豆素对小鼠骨■嗜多染红细胞微核的影响 **与阴性对照比较P0．01。 固相萃取技术在复杂中成药菊延保康颗粒剂含量测定中的应用 陈蕾朱霁虹(中国药品