肌红蛋白-鲁米诺化学发光反应和温度关系的研究.pdfVIP

第22卷增刊 分析试验室 V01．21 Suppl 2003年11月． Chinese of～valvsisLaboratorv ：()03—1l Joumal 肌红蛋白一鲁米诺化学发光反应与温度关系的研究 王常娜，宋正华+ (西北大学化学系，西安710069) 摘 要：以肌红蛋白一鲁米诺的化学发光反应为基础，考察了固体肌红蛋白在不 同温度下(在20mL／min氩气的气氛中)加热2h后，肌红蛋白水溶液一鲁米诺化 学发光体系的化学发光强度与温度的关系。实验发现：随着温度的升高，肌红蛋 白农度与发光强度之间的线性回归方程的曲线斜率逐渐增大，即灵敏度增高； 当温度升高到328 K时，肌红蛋白与鲁米诺之间的化学发光行为发生突变，并且 随着肌红蛋白浓度的增加，发光强度降低，其线性和灵敏度都很差。借助TG和 DSC热分析图谱发现：DSC热分析曲线得到肌红蛋白的相变温度为308．67K， 恰好对应于TG热图谱中第一个失重的温度309．10K。 关键词：肌红蛋白；化学发光；流动注射；热分析 肌红蛋白(myoglubin)，是～种小分子量(MW： 17．500)的稳定的血红素蛋白，可以可逆地与氧气 (温州龙方仪器配件厂)；所用管路均为聚四氟乙烯 结合，主要存在于哺乳动物的骨骼和心肌组织中， 管(i．d．1 mm)，实验中采用泵速为2．0 起到储存和运输氧气的作用。目前，肌红蛋白受到 mol／L 研究领域普遍重视，不仅是由于它在生理学上的作 (荧光纯)溶解在0．2 用，而且由于它与心血管疾病密切相关’卜3】。血 适浓度。 清中肌红蛋白浓度增加被认为是心肌梗塞形成的 1．2实验操作 最初标志：肌红蛋白的测定方法有电化学法。4’5]， 如图l所示．以二次重蒸水为载液，鲁米诺溶 质谱法’6’?，免疫和间接化学发光法。8’9。。 液浓度为5．0肚m。开动蠕动泵(2．0 6．5时，主 录仪基线稳定后，首先将200吐肌红蛋白试液通 最近本研究小组的实验发现：在pH 过六通阀注入到载流中，在混合管内与鲁米诺溶液 要以metmyoglobin形式存在的肌红蛋白可以与鲁 米诺反应，直接产生化学发光。10。。本文以肌红蛋 混合．在发光池内产生化学发光。发光强度用R． 白．鲁米诺的化学发光反应为基础，考察了固体肌 红蛋白在不同温度下(在20mL／min氩气的气氛 中)加热2b后．肌红蛋白水溶液一鲁米诺化学发光 (Iblank)。 体系的化学发光强度与温度的关系。实验发现：肌 ＼ 晰i 芎J 红蛋白在比学反应中的光学活性发生明显改变；绝 m～C 对温度从288～323K时，随着温度的增加，光学活 Ⅲ … Recorder 一 性增加，并且灵敏度增高；当肌红蛋白晶体加热到