当归指纹图谱的研究(I).pdfVIP

388 甘肃省化学会成立六十周年学术报告会暨二十三届年会论文集 当归指纹图谱研究(I) 马华侨，邸多隆，邵士俊，刘 霞，蒋生祥 (中国科学院兰州化学物理研究所西北天然药物研究发展中心兰州730000) 度、重现性、稳定性实验中共有蜂相对峰面积、相对保留时间的RSD。均小于5％。方法简便、实用、可靠，初步可以作为 评价当归药材的质量标准。 当归为伞形科植物当归(Angelicasinensis．01MDiels)的干燥根，作为临床中常用药材，已有两千多 年的药用历史。当归有活血化瘀，润肠止痛之功效【1．2】，是传统的名贵药材。产于甘肃岷县的当归(又 称岷归)是中国药典收载的正品当归，其资源极为丰富，有资料显示，仅甘肃定西地区，岷归种植面积和 产量均占全国的70％左右。当归化学成分复杂多变【34J，单一成分的确认难以代表其质量，为了控制当 归药材质量，按照国家药典委员会关于“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)的通知”的要求，并 参照相关文献【5．6】，采用HPLC方法对甘肃岷县等地种植的当归药材进行了指纹图谱研究。实验证明， 该方法简便、可靠、重现性好，可作为当归药材及其制剂指纹图谱研究的基础，也可为当归药材GAP生 产基地建设提供技术和理论依据。 l实验部分 1．1当归样品的采集 当归试样分别在能够反映当归当前种植水平的主产区，甘肃岷县、渭源县、漳县实地采取，按《中华 人民共和国药典》规定中药材取样法取样10批。 1．2样品的制备 40mL，超声提取45min，离心15rain。0．45／．tm膜过滤，备用。 1．3仪器与试剂 100系列高效液相色谱仪：水为二次蒸馏水，乙酸为分析纯(天津化学试剂厂)，甲醇为色谱 Agilentl 纯(山东省禹王实业集团禹城化工厂)；联苯(Aldrich公司，美国)。 1．4色谱条件 ranl，中国科学院兰州化学物理研究所色谱研究发展中心)，流动 C18反相色谱柱(Sv【rn，250ramx4．6 min min 相A：0．5％(v／v)乙酸水溶液，流动相B：甲醇：梯度条件：0A：B(3．％～70％)：70A：B(O， 100％)；紫外检测波长为275nm，参比波长为400nm；进样体积20uL；柱温25℃。 1．5内标溶液的配制 用联苯傲内标，称取5．9mg溶于50mL的甲醇中，备用。 2结果与讨论 2．1色谱条件的选取与优化 甘肃省化学会成立六十周年学术报告会暨二十三届年会论文集 389 以甲醇作为有机改性剂用于流动相，并用不同的梯度方式考察了色谱分离能力。以甲醇为流动相 添加剂时，色谱峰容量大，分离度较好、稳定性较高，最终选取以甲醇为有机改性剂时的梯度洗脱方式， 当归肿LC分离结果如图l。 图I当归指纹图谱 2．2波长的选取 在上述“1．2”提取条件和“1．4”色谱分离条件下，对全当归药材提取物进行了DAD紫外扫描，经分 析研究，选定275nm为检测波长，400hm为参比波长时，色谱峰较均匀，基线也较稳定。 2．3共有峰的标定 上述条件下的液相色谱指纹图谱共分离出60多个峰，经分析比较和对已知化合物的确认，找出比 较稳定色谱峰共墙个，具体如图2、表1。 图2几种不同产地当归指纹图谱比较 第一组峰上面的效字由上到下分别代表共有峰峰号和保留时问 ， 下面两纽峰上面的数字只代表保留时问，各自峰号和保留时r日J晟上一组对应 390 甘肃省化学会成立六十周年学术报告会暨二十三届年会论文集 表l共有峰的峰号及相对保留时间 2．4方法学的考察 。 2．4．1精密度实验 取供试品5#样溶样，连续进样5次，测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于 5