LC-MS%2fMS法研究大鼠脑透析液中氨丁苯酞的动态变化和其代谢产物.pdfVIP

第24卷增刊 质谱学报 V01．24Suppl 2003年10月 ofChineseMass Oct．2003 Journal SpectrometrySociety LC—MS／MS法研究大鼠脑透析液中 氨丁苯酞的动态变化及其代谢产物 乔晋萍1，侯佩玲1，褚凤鸣1，再帕尔·阿不力孜“’， 赵丽艳1，夏敏2，常 雁1，郭宗儒1 (1．中国医学科学院，中国协和医科大学药物研究所，北京100050； 2北京理化测试中心，北京100089) 微透析是以透析原理作为基础的在体取样 技术，是在非平衡条件下灌注埋在组织中的微透 ：50：40：l，体积比)，流速为0．3mL／min。所 析探针，组织中待测化合物沿浓度梯度逆向扩散 用溶剂和试剂为色谱纯或分析纯。 进入透析液，被连续不断地带出，从而达到从活 1．3微透析样品的收集 体组织中取样的目的。这是一种动态连续的取样 方法，在药物代谢和药代动力学研究中的应用倍 (10％，3．5mL／kg)，麻醉，固定在立体定位仪 受关注‘“。 上，切开头皮，暴露颅骨，在坐标为AP一+3．8 mm，肘上一+3．25mill和DV一一5．0 氨丁苯酞(ABP)是从广谱抗惊厥药中筛选 mm处钻 出的新型脑保护药物，能够从多个环节阻断脑缺 一个小洞，将一个套管插入纹状体中，用螺钉和 血引起的病理生理发展过程，是一个有前途的抗 牙科水泥固定。手术后大鼠恢复24h，将透析探 脑缺血的新药o]。本实验采用微透析取样技术直 针经套管缓慢插人大鼠的纹状体区中。用 接从大鼠纹状体区收集样品，经LC—MS／Ms法 Ringer溶液灌流，流速为1’0pL／min。因微透析 确定大鼠脑透析液中氨丁苯酞的动态变化及其 取样在清醒的动物体进行，为防止灌流线路缠 主要代谢产物。 绕，大鼠被置于一个特殊的装置中[“。平衡30 rain后，大鼠灌胃给药，80mg／kg氨丁苯酞，收 1实验部分 集微透析液。微透析样品未经任何预处理，直接 1．1主要仪器和试剂 进行LC—Ms／Ms分析，进样量为20pL。 APl3000液相色谱一质谱联用仪：美国ABI Ion 公司产品。质谱条件：离子源为Turbo 2结果与讨论 Spray，喷雾电压4．5kV，加热毛细管温度320 ℃，正离子方式检测，质谱扫描方式为多离子反 应监测模式(MRM)。 浓度一时间曲线。从该曲线中可以看出，ABP在 LCQ液相色谱一质谱联用仪：美国Finnigan脑中的变化出现双峰现象，分别出现在给药后 公司产品。质谱条件：离子源为ESI源，喷雾电 52rain和97rain。 压4．25kV，加热毛细管温度300℃，正离子方 式检测。 品中ABP的主要代谢产物，从得到的总离子流 氨丁苯酞(ABP)和乙酰化氨丁苯酞：本所郭图可以看出，在保留时间为6．86min和8．09 宗儒教授课题组提供。 1．2LC—MS／MS测定条件 留时间为6