制备细胞增殖分化、凋亡相关基因芯片的研究人参二醇诱导的基因表达谱.pdfVIP

中华中医药学会血液专业委员会第二届第六次血液学学术会议论文集 病理性早幼粒细胞增多。无论是治疗前或治疗后出现的高白细胞血症均可造成小血管血流淤滞、 血管壁被直接浸润损伤、局部血栓形成或出血。脑和肺部是最易累及的器官，可发生一系列神经 系统的症状和体征，甚至颅内出血而迅速死亡，或出现呼吸窘迫综合征，因呼吸衰竭而死亡。这是 最危险的并发症，也是患者早期死亡的主要原因。 鉴于高白细胞血症其特殊的病理生理学基础和临床表现，因此在治疗中既要迅速降低白细胞 数，又要预防高尿酸血症。 l、迅速降低白细胞数：目前能够迅速、有效、安全地降低白细胞数的方法是应用血细胞分离机 进行治疗性白细胞单采术。通过单采可清除患者血中的大量白血病细胞，一次有效的单采能予数 小时内使白细胞数降低20—60％，从而可在一定程度上减轻上述病理生理学过程，使高白细胞血 症迅速逆转，由于白血病细胞的减少可避免因细胞溶解破坏而引起的高尿酸血症。此外，由于患 者体内有相当数量的G0期或静止期细胞，单采术后可使静止期细胞进入增殖期，因而更有利于临 床治疗。我们对一组APL患者单采前后的白细胞数进行了动态观察，结果显示单采后24小时白 细胞数降低了10—82％，虽有时白细胞单采量与外周血白细胞数值的下降并不一定成比例，但患 者临床症状均有明显改善。由此可见，采用治疗性自细胞单采术可迅速缓解高白细胞血症，但对 贫血严重，血小板较低伴有出血倾向的患者，术前可酌情输注红细胞悬液、单供体血小板，以保证 术中安全。 为使白细胞数迅速下降，亦可静脉使用小剂量HA方案或口服羟基脲，1．5—2．5，每6小时1 次，总剂量可达109／d，大约用药36小时。 2、预防高尿酸血症：应及时饮水，口服碳酸氢钠，或静脉补液，输注碳酸氢钠，以期水化与碱化 尿液，提高尿酸盐的可溶性。应保证尿量150—200ml／／J、时，如充分水化后尿量仍少，可加用渗透 利尿剂甘露醇。当尿酸超过594．8umol／L更需注意尿酸肾病及肾功衰竭的发生，可酌情口服别瞟 呤醇0．29，3／d。 摘要一： 制备细胞增殖分化、凋亡相关基因芯片 研究人参二醇诱导的基因表达谱 高瑞兰1陈小红1林筱洁1钱煦岱1黄琦1吴超群2 1浙江中医药大学附属医院，2复旦大学生命科学院遗传所国家重点实验室 摘要目的：采用eDNA芯片分析人参二醇(PDS)诱导造血细胞增殖、分化相关基因的表达谱， 为PDS的作用机理提供基因表达谱方面的证据。方法：选用人造血细胞巨核系CHRF一288、粒系 膜芯片的制备根据研究目的，选择480个相关重要的功能基因，将eDNA克隆的模板DNA进行 记，与芯片上的eDNA探针杂交，用磷屏仪扫描结果。芯片结果数据以信号灰度定量为数值，用 ImaC,ene 3．0软件分析扫描结果。结果：(1)PDS诱导后表达水平上调三倍以上的基因按功能分成 十一类：甲基和乙酰化转移酶，诱导分化，抑制凋亡，转录调控蛋白，细胞周期蛋白，信号传递介导 蛋白和激酶，受体类，DNA和RNA聚合酶，磷酸酶，载体和转运蛋白类，RAS基因家族等。(2)细胞 26．7％(128／480)。排前五位的基因有信号传递介导蛋白和激酶31条，磷酸酶22条，转录调控蛋 白类基因15条，甲基和乙酰化转移酶及细胞周期蛋白各14条，受体相关类8条。(3)HL一60细 胞mRNA表达水平上调三倍以上的基因66条，占检测总数的13．8％(66／480)。排前五位的基因 有信号传递介导蛋白和激酶20条，转录调控蛋白10条，磷酸酶9条，诱导分化相关类5条，细胞分 一3一 中华中医药学会血液专业委员会第二届第六次血液学学术会议论文集 控蛋白类9条，受体相关类6条，甲基和乙酰化转移酶、MS基因家族各5条。(5)三株细胞经 转移酶类2条，信号传递介导蛋白和激酶类2条，磷酸酶类2条，诱导分化相关类和抑制凋亡类各 l条。结论：eDNA芯片研究PDS诱导的表达谱，表达水平增高的基因均与细胞增殖和分化有关， 与我们以前的动物模型、细胞学和蛋白质等研究的结果相符，三株细胞共同表达上调的基因可能 是各系造血细胞增殖、分化共同性的分子。上述结果为PDS的作用提供了基因表达谱方面的有力 证据。 摘要二 制备细胞增殖分化、凋亡相关基因芯片