固定化米曲霉发酵大豆多肽.docVIP

三峡大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 学位论文作者签名：郭少华 日 期： 2006.6.5 目 录 摘要 …………………………………………………………………………………………(1) 关键词 ………………………………………………………………………………………(1) 前言 …………………………………………………………………………………………(1) 1.选题背景 …………………………………………………………………………………(3) 2.方案论证 …………………………………………………………………………………(4) 3.实验部分 3.1实验材料 ………………………………………………………………………………(6) 3.1.1菌种 …………………………………………………………………………………(6) 3.1.2培养基 ………………………………………………………………………………(6) 3.1.3溶剂与试剂 ………………………………………………………………………(6) 3.1.4主要仪器设备 ………………………………………………………………………(6) 3.2实验方法 ………………………………………………………………………………(6) 3.2.1大豆多肽菌种的分离及纯化 ………………………………………………………(6) 3.2.2米曲霉菌球的制备 …………………………………………………………………(6) 3.2.3固定化方法 ………………………………………………………………………(7) 3.2.4水解条件的确定 ……………………………………………………………………(7) 3.2.5大豆多肽溶液的制备 ………………………………………………………………(7) 3.3发酵上清液的检测 ……………………………………………………………………(7) 3.3.1 DH值(水解度)的测定………………………………………………………………(7) 3.3.2纸层析法分析发酵上清液中大豆多肽分子量 ……………………………………(8) 3.3.3 Folin-酚法测定大豆多肽含量 ……………………………………………………(8) 3.3.4大豆多肽溶液的苦味评定……………………………………………………………(8) 4.结果分析 …………………………………………………………………………………(8) 4.1甘氨酸标准曲线的测定…………………………………………………………………(8) 4.2固定化方法的确定 ……………………………………………………………………(9) 4.3大豆蛋白水解条件的优化 ……………………………………………………………(9) 4.4纸层析法分析发酵上清液中大豆多肽分子量………………………………………(11) 4.5分光光度计法定量测定大豆多肽含量………………………………………………(11) 4.6大豆多肽溶液的苦味评定……………………………………………………………(13) 5.小结………………………………………………………………………………………(13) 致谢…………………………………………………………………………………………(13) 附录…………………………………………………………………………………………(13) 参考文献……………………………………………………………………………………(14) 固定化米曲霉发酵大豆多肽 学生:郭少华 指导老师:邵伟 三峡大学 化生学院 摘要：大豆多肽是从大豆蛋白质中获取的最佳营养方式。由于传统的大豆多肽制备多以各种蛋白酶水解大豆蛋白为主，其蛋白酶来源有限且成本较高。米曲霉在发酵的过程中能分泌多种蛋白酶，包括内切酶和外切酶，因此可以直接用米曲霉对大豆蛋白进行降解来制备风味良好的大豆多肽。本实验对米曲霉的固定化以及固定化米曲霉来发酵大豆多肽进行初步研究。结果表明海藻酸钠的浓度为2.0%，固定化的时间为4h为最佳固定化条件。pH值为6、时间为84h 、接种量为10%、大豆蛋白含量为6%的条件是米曲霉发酵大豆蛋白的最佳条件。固定化细胞具有反应速度快、微生物流失少、产物容易分离、反应过