生物化学实验方案.docVIP

Marker做琼脂糖凝胶电泳，发现Marker在加样孔有一个明显的亮带，什么原因？参考见解：marker有时会出现这样的问题,应该是时间久了。新买时跑胶在点样孔没有,过一段时间就会在点样孔出现亮点。也可能是蛋白，有时DNA提的不纯含有蛋白时就会出现上样孔有条带的现象。 ? 琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?( x9 U8 g0 C/ [2 Z9 i$ U3 n+ J+ W参考见解： DNA带模糊??： 1、 DNA降解??避免核酸酶污染。% x9 L) }, Y1 L% x. s6 `( X2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。/ f. ^+ d) M# O2 ? U! E `3、所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30,巨大DNA链，温度应＜15，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。( b3 K5 y9 c1 V) F8 N4、 DNA样含盐过高??电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 q$ p) U$ e1 _2 N q5、 有蛋白污染??电泳前酚抽提去除蛋白。6、 DNA变性?电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。 ? 将从组织提取的DNA进琼行脂糖凝胶电泳，用的1.5%的胶加了EB，80V跑1小时，溴酚蓝已经跑到头了，在紫外灯观察什么带也没有，只见孔里面有橘红色的亮光。好象