分子生物学考试特训.docVIP

1、复制叉（replication fork）：在双链DNA分子的复制过程中，dsDNA必须解开螺旋，每一单链作为母链同时进行子链的复制，形成叉状结构，为复制叉。 2、自主复制序列（ARSs，autonomously replicating sequences）：维持完整真核生物染色体必须具备着丝点、端粒和自主复制序列。自主复制序列在DNA复制过程中，与特定蛋白质因子结合后，能够发动复制。 3、DNA克隆（DNA cloning）：将目的DNA片段与能够自主复制的载体连接组成重组DNA，借助宿主的增殖，在体外进行扩增，得到预期数量的、完全相同的DNA，然后再将目的片段提取出来。以上的有关操作过程就是DNA克隆技术，不经生殖细胞的融合就能将DNA的数量大量扩增，得到一系列遗传组成完全一致的DNA片段，达到可操作水平。 4、酵母人工染色体（YACs，yeast artificial chromosomes）：用于复制、保存和携带较大片段的外源真核细胞DNA。所有典型的YACs必需包括三部分：着丝点、端粒和复制起点（自主复制序列），在酿酒酵母的细胞周期内能进行正常的复制和分离； YACs的克隆位点经限制性内切酶作用能形成两个末端，可与长达1Mb以上的外源DNA片段连接。 5、聚合酶链反应（PCR，polymerase chain reaction）：通过使用与模板母链互补配对的引物，在DNA聚合酶作用下，选择合适的反应条件，不断重复模板dsDNA变性、引物退火、聚合合成DNA的循环过程，短时间内能将模板分子大量扩增，成为分子生物学的有力研究手段。 6、DNA指纹鉴定技术（DNA fingerprinting identification）：DNA克隆和测序技术都显示出人类基因组中有很多的重复序列，某些简单序列的重复次数因人而异，而且可以遗传给后代。通过限制酶切割基因组DNA，得到一系列DNA片段，与探针杂交，检测某些特征重复序列的有无和拷贝数；某些家族具有特征性的简单重复序列，毫无亲缘关系的个体没有这样的序列，亲缘关系远近差异反映在序列拷贝数的多寡等方面，利用此种序列可以确定个体的亲缘关系和性质，这样的DNA鉴定称DNA指纹鉴定技术。 7、转录复合物（transcription complex）：基因的转录过程经历起始、延伸和终止三个主要阶段，由RNA聚合酶合成RNA转录产物；每个阶段需要的转录因子各不相同，各种转录因子选择和作用的DNA序列也不一样；因此，在转录的各个阶段和细胞生长的各个时期，多亚基组成的RNA聚合酶作为核心，分别与不同的转录因子结合，形成的各种特定复合物为转录复合物。 8、羧基末端结构域CTD（carboxyl-terminal domain）：真核细胞RNA聚合酶II大亚基的羧基端具有特殊肽段，构成单位是含7个氨基酸的7肽，序列组成为酪氨酸-丝氨酸-脯氨酸-苏氨酸-丝氨酸-脯氨酸-丝氨酸（Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser），被称作羧基末端结构域CTD；该7肽序列在鼠和酵母的RNA聚合酶II当中分别重复52次和26次，影响细胞的生活力。 9、增强子（enhancers）：存在于很多真核细胞中，作为转录的调控序列，能促进基因的转录，通常距离转录起点数千碱基对。典型的增强子序列单位长100~200bp，可重复多次，重复次数影响其效力。生物体内的增强子类型可因细胞而异或仅有一种通用形式，启动子和增强子的序列组成和功能多有重叠交叉之处，一般的增强子具有如下特征：（1）强烈地促进相关基因从起点开始转录。（2）无论位于相关基因的上游或下游都可促进转录。（3）在距离转录起点1kb以上的上游或下游区域内都可发挥作用。（4）当启动子串联排列时，优先作用于距离最近的一个。 10、C2H2锌指结构（C2H2 zinc finger）：C2H2锌指结构是由两半胱氨酸和两组氨酸锚定12个氨基酸所组成的环形结构，四个氨基酸彼此等间距地围绕在锌离子周围，形成四面体。这种蛋白样式能紧密折叠，进而形成两β-股条和一α-螺旋，α-螺旋区结合在DNA的大沟，由保守的碱性氨基酸组成，可作用于DNA。这种结构在RNA pol III的转录因子TFIIIA中重复9次，在转录因子SP1中重复3次；因此，如果形成能结合DNA的结构域，必须重复3次以上。 11、RNase P（RNA nuclease P）： RNase P由1个RNA分子和1个蛋白分子构成，是简单的RNP，可以加工tRNA的5末端，产生成熟结构。真核细胞和原核细胞中都含有这种酶；在真核细胞中，RNase P由是位于核区的小型核蛋白；原核细胞RNase P的RNA分子含377nt，进化中的二级结构极其保守，碱性小分子蛋白质分子量为13.7kDa。在体外的试管实验中，如果供给